TLR13与肠道菌群在柯萨奇病毒性心肌炎发病中的作用及其机制.pdf

TLR13 和肠道菌群在柯萨奇病毒性心肌炎发病中的作用及其机制 中文摘要 中文摘要 病毒性心肌炎（Viral myocarditis ，VMC ）是一类由病毒感染引起的以心肌局 灶性或弥漫性炎症为主要特征的临床常见心血管系统疾病。VMC 全球发病率估计 在0.12-12%之间，近年来我国VMC 发病率呈上升趋势，发病率约为5 ％～15％， 已成为青少年猝死的主要原因之一。急性VMC 患者起病隐秘性和缺乏治疗手段， 因此其真实发病率往往被低估。急性VMC 还可迁延进展为慢性心肌炎或致死性扩 张性心肌病（Dilated cardiomyopathy，DCM ）。VMC 已成为影响人类健康的一类 重要的心血管感染性疾病，然而迄今为止尚无有效的治疗方法，根本原因在于VMC 的发病机制尚未明确。因此，阐明VMC 的发病机制具有重要的理论和实践意义。 病毒感染是VMC 发病的主要病因。肠道病毒、腺病毒、流感病毒、巨细胞病 毒等都能诱发VMC ，其中肠道病毒尤其是B3 型柯萨奇病毒（Coxsackievirus B type 3，CVB3 ）感染引起的VMC 占肠道病毒感染诱发的心肌炎病人数一半以上。CVB3 为微小无衣壳正链RNA 病毒，属于小核糖核酸病毒科。CVB3 经粪口途径感染食 道和胃肠道之后，经由柯萨奇-腺病毒受体（Coxsackie-adenovirus receptor，CAR ） 和辅助受体衰变加速因子（Decay accelerating factor ，DAF ）感染肠道，病毒入血 后感染胰腺和心肌细胞，在感染的第7-10 天诱导急性胰腺炎和急性心肌炎，并在 感染一个月后可诱导慢性心肌炎。 病毒性心肌炎的发病机制长期受到关注：已知 CVB3 的裂解性复制直接破坏 心肌细胞；CVB3 还通过编码Pro2A 和衣壳蛋白VP2 诱导心肌细胞凋亡。研究报 道VMC 易感性不同的雌雄小鼠在病毒感染后第7 天，心肌中的病毒载量相当。此 外，利用基因敲除小鼠（TLR3-/-, TRIF-/-, CD4-/-, MyD88-/-等）证明易感性不同的 小鼠却有着相似的心肌病毒载量，提示病毒复制在 CVB3 诱导的心肌炎发病中并 非至关重要的因素。越来越多的研究结果表明，虽然 CVB3 在感染早期可直接导 致心肌细胞坏死，但CVB3 感染诱导的心肌局部炎症细胞浸润和炎症损伤是VMC 发病的主要原因。心肌局部浸润的免疫细胞包括Th1、Th17 淋巴细胞、M1 型巨噬 细胞和嗜中性粒细胞，以巨噬细胞为主。上述免疫细胞分泌的炎症细胞因子如 、 、IL-6、IL-17 是主要的心肌炎炎症相关细胞因子。我们实验室前期 I 中文摘要 TLR13 和肠道菌群在柯萨奇病毒性心肌炎发病中的作用及其机制 研究给VMC 小鼠输注Th2 型细胞因子如IL-4 和IL-13 和M2 型巨噬细胞或体内诱 导Th2 型极化具有治疗VMC 的作用。 众所周知，固有免疫是机体抗感染过程中的第一道防线。近年来，固有免疫 越来越受到关注，因其在启动和调控后续适应性免疫应答格局起重要作用，并且 固有免疫也不再是人们之前认为的“非特异”免疫。固有免疫细胞如巨噬细胞和DC 表面或胞内的多种模式识别受体（PRRs ）通过识别病原体特定的病原相关分子模 式（PAMPs ），激活固有免疫信号通路，启动促炎因子和I 型干扰素（ ） 分泌和抗原提呈相关分子（MHC II 和B7 ）高表达，因此固有免疫对特异性免疫应 答T、B 淋巴细胞的活化不可或缺。而固有免疫一旦失控往往导致各类炎性疾病， 如炎症性肠病（IBD ）和自身免疫病（SLE）。以往对VMC 的研究重点大多放在 适应性免疫应答，特别是Th1、Th 17、Treg 等在VMC 发病中的作用及机制，而针 对 VMC 固有免疫的研究较少。因此，本研究提出如下假设：在炎症性 Th1/Th17 应答诱导之前，心脏局部的炎症性固有免疫对于炎症的诱导和放大、对于Th1/Th17 应答的激活发挥了关键的作用，经心脏局部PRR 信号通路激活的炎症性固有免疫 在VMC 发病中扮演关键的初始作用。研究CVB3 感染早期在肠道和心脏局部激活 的关键的模式识别受体，及其启动的促炎信号和炎症效应及抗病毒效应，进而对 炎性Th1/Th17 细胞浸润至心肌组织造成免疫损伤的影响，对于阐明VMC 的发病 机制提出了创新性的思路。 过去的研究提示TLR3/TLR4/TLR7/8/9 和MDA5 都参与了抗CVB3 的固有免 疫的激活，其中TLR3 激活上调 的表达发挥了显著的心肌炎保护作用而TLR4 激活则加剧心肌炎症和小鼠死亡，MDA5 在VMC 中的作