茉莉酸甲酯对曼陀罗毛状根的生长和次生代谢产物产生的影响.pdfVIP

茉莉酸甲酯对曼陀罗毛状根的生长及次生代谢产物产生的影响植物学专业硕士研究生：孙际薇指导教师：孙敏教授摘要茄科曼陀罗属的曼陀罗??????是重要的药用植物。近年来，随着对东莨菪碱药理作用的深入研究和广泛应用，围绕曼陀罗进行的研究很多，而通过诱导子刺激毛状根中次生代谢产物的迅速积累又是其中的研究热点。本文以发根农杆菌????????歉?┡└司??癉????备脑旌螅?Ａ鬑???质粒，导入???柿６?傻姆⒏?└司?和曼陀罗??????叶片为材料，经过侵染、共培养、除菌、扩大培养等过程得到曼陀罗毛状根培养体系，以此为基础，测定其生长动态曲线及东莨菪碱和莨菪碱合成动态变化，再分别采用浓度诱导和时间诱导，研究茉莉酸甲酯对曼陀罗毛状根生长、逆境生理特性和主要次生代谢产物含量的影响，对获得价格昂贵的天然药物东莨菪碱和莨菪碱具有重要的理论意义和应用前景，主要研究结论如下：??臼笛槭紫壤?梅⒏?└司鶦??侵染曼陀罗叶片，共培养?培养??笥遥?盏嫉玫铰?勇廾?锤?＞??鄄欤??勇廾?锤??／??液体培养基中生长良好，生长速度较快，于是实验扩大培养时，均采用???液体培养基进行曼陀罗毛状根的增殖培养。经过除菌和扩大培养后，最终得到良好的曼陀罗毛状根培养体系。培养所得曼陀罗毛状根成圆形团块状，这应是与培养时所用圆底烧瓶形状和摇床的规律性圆周转动有关。而且，圆形团块状毛状根的中间部位颜色较深，越向外其颜色越浅，中间的深色部位是由老根形成，而周围颜色较浅的毛状根是生长出来的新根。??笛槎月?勇廾?锤??∨嘌?囊恍┗?咎匦宰隽搜芯俊＝峁?砻鳎??勇?毛状根生长曲线存在延迟期?．??，之后便进入快速生长期???????锷?の榷ㄆ冢??竺?锤??ぜ趸海?饔谄轿群笾鸾ハ陆怠?曼陀罗毛状根中，东莨菪碱和莨菪碱的合成量随着毛状根培养时间的增加而增加，?笥遥??锤?卸?馆屑詈洼馆屑畹暮铣闪看锏阶畲??笥遥?疵?锤??さ奈榷ㄆ诤螅??馆屑詈洼馆屑詈铣擅飨约趼??且含量降低。实验结果说明曼陀罗毛状根的生长高峰期与生物碱合成高峰期一致，?螅?庹?生长高峰期，?当曼陀罗毛状根在培养?值，在??，?????? 均在?入诱导子时间选择在培养??螅?耸苯?泻笃谟盏际匝樾Ч?罴选???笛橹刑教至塑岳蛩峒柞ザ月?勇廾?锤??ぜ澳婢成?硖匦愿髦副甑挠?毛状根进行诱导处理的鲜重增殖倍数和干重增殖倍数均高于其他几个处理，因此考虑用浓度为?????·??的?进行时间梯度诱导处理。曼陀罗毛状根经浓度为????．?腗??砗螅??じ叻迤谔崆??鱿郑??砗蟮拿?锤?伞⑾手?也随之降低而趋于稳定；??氏窒壬仙?傧陆岛笄饔谖榷ǎ籆?活性呈现先降低后升高再降低后趋于稳定，且?直；っ富盍Ρ浠?胗盏寂ǘ群陀盏际奔溆泄亍?结果说明，?对曼陀罗毛状根氧化酶活性有影响，能较好地刺激曼陀罗毛状根保的积累并向培养基中释放，能显著促进处理?分的积累并向培养基中释放。关键词：茉莉酸甲酯；曼陀罗；毛状根；次生代谢产物?笥遥??诼?勇廾?锤?纳?ず椭饕4紊??徊?锖铣闪浚?笛橹屑?响。由实验结果可以看出茉莉酸甲酯对曼陀罗毛状根生长有抑制作用。经不同浓度的?进行诱导处理后，曼陀罗毛状根根尖出现变黄和褐化现象，其鲜重和干重及其增殖倍数都明显低于对照。在五个浓度处理中，用??????．??月?勇?均明显低于未添加?的对照毛状根干、鲜重。经诱导子?处理后，曼陀罗毛状根的?。、可溶性蛋白质、??副辍⒏?彼岷?烤?胁煌?潭鹊脑黾踊蛳仍黾?后降低的趋势；??钚韵瘸鱿衷龈咔魇疲?孀排嘌?奔涞难映ぃ琒?酶的活性护酶活力的增强，有利于主要次生代谢产物成分的合成积累。??笛榻峁?砻鳎?岳蛩峒柞ツ苡行?岣咻馆型槔嗌?锛畛煞衷诼?勇廾?锤?中的积累并刺激其向培养基中释放。?能显著促进曼陀罗毛状根中东莨菪碱成分???舐?勇廾?锤?休馆屑畛?西南大学硕士学位论文? 瑃????????????築??????瑂????????????????????甌??????琓???．????????：???????：??．???瑂????????．??，???????瓾?????琲??瓵?????，????甴??????????????甀?????，???畐???????甌????．?????????瑃??—??．??產????．?????⒗鷗??—????瑂???????甎??琹???琲????甶???，???????琩???甇??????．????：?? 毛状根曼陀罗所含的莨菪烷类生物碱具有解痉镇痛、麻醉镇静、止咳平喘、扩张毛细血管、改善微循环以及抗晕船晕车等功效【?俊Ｋ孀哦远?馆屑钜├碜饔玫纳钊胙?究和广泛用于临床镇静、戒毒脱瘾、治疗麻痹症、晕动症、胃肠痉挛性绞痛、三叉神经痛和有机磷农药中毒等，在原有巨大市场基础上，其需求还在迅速增长【?俊?近年来，有研究报道称，