神经干细胞和替莫唑胺对脑胶质瘤大鼠生存状况影响的研究.pdf

㈣生存芸况影竺的研究神经干细胞与替莫唑胺对脑胶质瘤大鼠。‘???痩摘要目的：探讨神经干细胞与替莫唑胺对脑胶质瘤大鼠生存状况的影响。方法：实验共分三部分。第一部分：大鼠神经干细胞的分离、培养和鉴定。??∮迷????斓奶ナ螅?诱庑┨ナ竽灾蟹掷氤錾窬?上赴???????琋??，然后利用无血清培养的方式进行培养以及传代；???分离出的神经干细胞用免疫荧光进行???鉴定，然后将纯化后的第??代神经干细胞球重悬，并进行培养，使得其活性呈最佳状态，并调整细胞密度为???觯????谩５诙?糠郑捍笫驝?越褐柿瞿Ｐ徒?ⅰ??取冻存的?胶质瘤细胞进行细胞复苏、培养，测定细胞存活率，取其对数期细胞，同时调整细胞密度为??觯????茫?⒔ú糠治从玫腃?褐?瘤细胞冻存；??《允?诘腃?褐柿鱿赴???媚粤⑻宥ㄏ蛞窍虼笫蟮?尾状核接种，构建?脑胶质瘤模型大鼠?只，观察大鼠术后的生存质量以及生存时间，并记录，其中有?淮笫笠馔馑劳觥５谌?糠郑荷窬?上?胞与替莫唑胺对脑胶质瘤大鼠生存状况影响。利用神经干细胞与替莫唑胺治疗大鼠?胶质瘤，经第二部分处理后的第?欤??Ｏ碌??荒Ｐ痛?鼠随机抽取两只处死，剖颅取出肿瘤组织进行?染色。剩下?只随机分为四组：对照组?组?⑸窬?上赴?踩胱???、替莫唑胺组?组??替莫唑胺联合神经干细胞组?组?籄组：麻醉并固定，立体定位头架引导下向瘤内注入生理盐水??。?椋郝樽砉潭ǎ?诹⑻宥ㄎ煌芳艿囊??下将总数为???龅???窬?上赴?⑷肫淞瞿凇?组：利用灌胃针向?? 大鼠灌入替莫唑胺：??／?，连服?臁?组：麻醉固定，在立体定位头架的引导下将总数为???龅???窬?上赴?⑷肫淞瞿冢?窬?上?胞注入的第二天开始用灌胃针向大鼠灌入替莫唑胺??／?，连服?臁?对大鼠生存质量及生存期进行观测、记录，对大鼠的生存期行生存分析，并绘制图表；模型大鼠死亡后行剖颅探查并取出肿瘤，观察并用电子天平称量，记录数据，进行统计学分析，并绘制图表；称量后将肿瘤组织进行?染色。结果：第一部分大鼠神经干细胞的分离、培养和鉴定：分离的胎鼠神经干细胞，大量的细胞呈单细胞悬浮生长的状态，并形成大小不等、细胞量不同的细胞球；行免疫荧光染色???呈阳性，证实了该细胞为有活性的神经干细胞。第二部分大鼠?脑胶质瘤模型建立：???褐柿鱿赴?诙?数期时，细胞生长排列紧密，疏密均匀，贴壁较牢；大多数呈多角形、梭形。??菇??籗?坌源笫驝?越褐柿瞿Ｐ停菏踔?只大鼠死于麻醉意外，?淮笫笥谑质醯谌?焖烙诼?谘V祝?只大鼠于第?觳幻髟??死亡；剩余的?只模型大鼠进入实验处理与分析。建模大鼠手术后第?天即自行觅食，但活动量、进食及饮水量较术前减少，皮毛不整洁，颜色欠光泽，精神萎靡；接种后第?欤?セ餍形!⑻颖苄形?性銮俊５谌?部分神经干细胞与替莫唑胺对脑胶质瘤大鼠生存状况影响：神经干细胞植入组?组?⑻婺_虬纷???及替莫唑胺联合神经干细胞组?组?较对照组?组??嬷柿棵飨缘母纳疲籄、??、?淖榈钠骄??嫫诜?别为：?．??臁????天、?．??臁????天。采用两两间的???—???ǚ治觯築、??三组均较?樯?嫫谘映ぃ?臣蒲в胁钜? ．???獴、??三组之间生存期比较却无统计学差异??．??８?组大鼠死亡后剖颅观察：均可在右侧大脑半球稍前端形成椭圆形肿瘤。????、?淖橹琢鲋亓糠直鹞#??．???．???????±????，?．???．???????±????；行组间的方差分析，????，????，差异有统计学意义，可以认为四组的重量不全相同；故采用?检验进行两两比较，经?煅榻?辛搅奖冉咸崾荆篈组大鼠的肿瘤重量较????三组均较重，比较有统计学差异??．?????、?橹?淞搅奖?较示：肿瘤重量的比较无统计学差异??．??Ｋ淖榈慕褐柿鲎橹疕?旧?切片都见肿瘤细胞生长极为活跃，并伴有一定的浸润性；正常脑组织与肿瘤交界处能见到大量浸润生长的肿瘤细胞，有明显的界线，瘤体内的血管增多增粗。结论：??窬?上赴?苡肗?????ǎ??ê罂捎糜谟泄厣窬?上赴?的实验研究。??捎昧⑻宥ㄏ蚍ń?⒋笫驝?越褐柿瞿Ｐ涂煽啃浴⑽榷ㄐ越细撸?媚?型是脑胶质瘤较为理想动物模型，适于脑胶质瘤的实验研究。??窬?上赴?裳映つ越褐柿龃笫蟮纳?嫫冢?岣呱?嬷柿浚?跚嶂琢鲋?且??窬?上赴?:咸婺_虬方系ヒ坏奶婺_虬坊蛏窬?上赴?瘟平褐柿?大鼠，生存期、生存质量以及肿瘤重量未见明显改善。关键词：神经干细胞；?胶质瘤细胞；替莫唑胺；生存期里。 衄??黲?????．????篢?????????????????瑃???????????蓇??蒾?????????????????農?????琽????籥??????????????琣??蒾???，????巧，??，???籭????瑃?????：????．????簍??????琧???????????玪??，