刘成胜脂肪颗粒在PRP刺激下活性研究.docVIP

脂肪颗粒在PRP刺激下的活性研究 摘要：目的 以添加PRP的DMEM培养液孵育脂肪颗粒，以葡萄糖转移量来检测脂肪颗粒的活性，为脂肪颗粒移植研究提供一个良好的基础。方法 将相同条件下抽取的脂肪颗粒分为2组，一组用2750mg/L浓度的DMEM直接孵育，一组用2750mg/L浓度的DMEM添加适量的PRP孵育，同时设一个不含脂肪颗粒的空白标本，所有标本同时进行孵育，12h后检测每个标本DMEM中葡萄糖的浓度。以空白标本的葡萄糖浓度为基础浓度，其与每个实验标本的葡萄糖浓度差值代表标本的葡萄糖转移量即活性。结果 各组标本经含糖DMEM孵育后，其葡萄糖转移量即活性经分析检验得出：DMEM+PRP组DMEM组，即添加PRP，脂肪颗粒的活性增强。结论 添加PRP利于脂肪颗粒的成活性。 关键词： 脂肪移植 脂肪颗粒活性 葡萄糖转移实验 自体脂肪组织移植已有上百年的历史，由于其来源丰富、取材容易、操作简单、充盈外形好、无排异反应等优点，倍受整形美容外科医生的重视，曾被用于充填颜面部的凹陷畸形，如颜面萎缩、凹陷性瘢痕、眼脸下陷、鼻唇沟过深等，也被用于隆乳、隆颞和隆鼻等美容手术。但移植脂肪成活率较低极大地限制了其在临床的广泛应用。本文设计添加PRP到脂肪颗粒中，以期提高移植的脂肪颗粒的成活性，使脂肪移植更好的应用于临床。 1 材料与方法 1．1组织标本 自体脂肪组织 自体PRP（健康人吸脂手术得到的脂肪组织和抽取的自体血液制备的PRP） 1．2主要试剂 DMEM/HIGH GLUCOSE（1×）和DMEM/LOW GLUCOSE（1×）来自HyClone，正规胰岛素美国Sigma公司。 1．3主要仪器和材料 37℃，5%CO2恒温培养箱（日本SANYO公司）超净工作台，离心机。移液枪，移液管，100MM培养皿。50ML离心管。 2 实验方法 2．1培养液的配制 用含4500mg/L 葡萄糖的DMEM/HIGH GLUCOSE（1×）和含1000mg/L 葡萄糖的DMEM/LOW GLUCOSE（1×）以1：1比例配制200ml，其终浓度为2750mg/L,并添加20U正规胰岛素。 2．2组织孵育与培养液葡萄糖检测 将同条件抽取的脂肪颗粒移入50ML离心管中，用配制的DMEM清洗，静置分层后取完整的脂肪颗粒，移入另一50ML离心管中重复清洗两次。取100MM培养皿分三组标记,每组五个样本。A组设空白组，只加配制的DMEM 8ML。B组加配制的DMEM 8ML,加2ML脂肪颗粒，C组8ML 配制的DMEM添加1ML PRP，所有标本同时进行孵育，12h后各组取澄清的培养液1ML,测量每个标本DMEM中葡萄糖的浓度。各组的葡萄糖浓度测定由清华大学医院完成。以空白标本的葡萄糖浓度为基础浓度，其与每个实验标本的葡萄糖浓度差值代表标本的葡萄糖转移量即活性。 2.3 结果 检测结果如下： 表1.葡萄糖（GLU）检测结果（mmol/L） 分组12345?x±sA组17．3716.9917.0617.1217.0717.12±0.15B组11.3710.9211.4611.2811.1511.24±0.21C组10.5210.4610.3910.149.4910.20±0.42 A组与B组葡萄糖浓度平均值之差为5.88,A组与C组葡萄糖浓度平均值之差为6.92.由此可见，C组葡萄糖转移的量较B组多，说明添加PRP利于脂肪颗粒的活性。 3 讨论 富血小板血浆（PRP）是全血经过离心分离而得到的血制品，含有全血中70％以上的血小板．现已知PRP是自体生长因子库．富含多种生长因子．如血小板源性生长因子（PDGF）、转化生长因子（TGF）、成纤维细胞生长因子（FGF）和胰岛素生长因子（IGF）等。这些生长因子对细胞的生长分化和组织的形成有着重要作用。近年来的研究表明，PRP能促进骨修复。在国外，PRP已逐步应用于口腔种植、颌面重建外科、牙周外科等领域。脂肪移植成活率低一直是脂肪移植的主要问题，PRP能够促进移植的脂肪颗粒成活，使脂肪移植更安全有效。 参考文献： [1] 陈瑜. 脂肪移植物的活性检测研究。中国美容医学，2006，15（6）：740-742 [2] 郑丹宁，雷华，李青峰. 多种生长因子及DMEM培养液对植入脂肪成活率影响的研究[J]。中国美容医学，2005，14（1）：34-36 [3] 雷华,李青峰. 葡萄糖转移方法检测脂肪颗粒活性的研究[J].中华整形外科杂志,2005,21(5):375-378. [4] 李雁. PRP在口腔种植中的研究进展。中国口腔种植学杂志，2008，13（1）：40-43