微流控芯片概述.pptVIP

微流控芯片;微流控芯片实验室;微流控芯片实验室(lab-on-a-chip);微流控分析芯片实验室的结构特点 ;提高分辨率 --梯度洗脱技术;1-3 min/ 12 samples;Connector made for PCR application, the complete PCR is done in the chip and connector: ;微流控芯片与微阵列芯片有显著的不同，它主要依托分析化学和生物学，芯片的构造为微管道网络结构，通过微管道中的流体控制来实现分离和分析的目的，一张芯片可重复使用数十至数千次；而微阵列芯片主要依托生物学，通过生物分子之间的杂交实现检测的目的，一张芯片一般只使用一次。;微流控芯片的制作 ;微流控芯片的基本加工;微流控芯片制备;蚀刻是在光刻过的基片上可通过湿刻（wet etching）和干刻（dry etching）等方法将阻挡层上的平面二维图形加工成具有一定深度的立体结构。选用适当的蚀刻剂，使它对光胶、薄膜和基片材料的腐蚀速度不同，可以在薄膜或基片上产生所需的微结构。 复杂的微结构可通过多次重复薄膜沉积－光刻－蚀刻这三个工序来完成。 微流控基片通过预处理，涂胶，前烘，曝光，显影及坚膜，去胶等步骤后，材料上呈现所需要的图形，即通道网络。;盖板与微流控芯片基片的封接;微流体的控制与驱动 ;电渗控制是指在电场作用下，微通道中的液体沿通道内壁作定向移动的现象。影响电渗流的因素包括通道表面的组成，缓冲液性质，外加电场强度，温度等，通过对这些影响因素的调节，改变通道内壁表面的电荷性质和密度，调节微通道网络中不同节点的电压值，就可控制电渗流即微流体的迁移速度和运行方向，完成较为复杂的混和，反应和分离等操作。 Baker等报道利用聚合高分子电解质涂层，进行聚苯乙烯和丙烯酸为基质的微芯片通道内表面的涂层改性，从而控制微系统中液流的流动方向，甚至可以在一个通道内实现两个流向相反的液流的同时操作。;凡是能控制微通道闭合和开启状态的部件，并具有低泄漏，低功耗，响应快，线性操作等性能，均能作为微流控芯片中的微阀。 微反应器是一种单元反应界面为微米级的微型化学反应系统，随着微反应器线性尺度的减小，对化学反应非常重要的浓度，压力，密度，温度等梯度很快得到增加，从而使混合和反应时间缩短到毫秒级以下。 生物样品分析如DNA杂交，酶反应，蛋白折叠等均涉及到样品的快速均匀混合，反应物的混合程度直接影响着反应的速率和产物的得率；微通道中通道较短，体积较小，反应时间很短，反应相对难以完成，所以快速均匀混合显得尤其重要，因此微混合器也就成为微流控集成设计的重要组成部分。 ;进样及样品前处理 ;信号采集的控制与检测 ;操作程序简述 ;芯片实验室应用和发展;1998年，美国Nanogen公司的Cheng等人在Nature的Biotechnology杂志上发表了关于芯片实验室的论文。他们通过芯片组合将样品制备，生化反应和结果检测三个部分的工作依次完成，这是世界上第一个严格意义上的微型全分析系统操作。 通过该系统将大肠杆菌从人的血细胞和大肠杆菌混合液中分离出来，富集后在芯片上进行裂解细菌，释放出核酸物质，再进行杂交检测。 原始样品进入阵列后，微电极上施加特定频率的交流电信号，所需的大肠杆菌细胞受到正向介电电泳力，被吸附在微电极周围区域，而人的血细胞受到负向介电电泳力被推离微电极区域，即悬浮在溶液中。在流动相的清洗作用下便可除去人的血细胞，留下所需的大肠杆菌细胞。然后，在微电极上施加高压脉冲电信号，使得吸附在微电极周围区域的大肠杆菌细胞破裂，释放质粒DNA，基因组DNA和RNA等核酸物质，从而实现从原始样品到核酸的样品制备过程。生化反应和结果检测也在微电极阵列上完成。单个微电极上可以固定不同的探针，通过微电极的选通或是关闭，以捕获和检测相对应的核酸物质。 ;用于RNA病毒的检测芯片：温控单元和温度传感部件均置于反应室中，由铂金制成，不同的温控分别完成逆转录和PCR；而控制单元则由微阀和微泵组成，以控制流体运输。利用该装置成功检测了II型登革热病毒和肠道病毒EV71。 ;微流控芯片对单个细胞及胞内的微量物质的分析与检测：在同一芯片上集成细胞培养、运输、清洗、破碎、样品纯化和电泳分离等操作单元。 构建不同尺度且相对封闭的二维或三维网络结构，避免外界的污染。芯片材料多采用聚二甲基硅氧烷PDMS，具有良好的生物相容性，对气体也有一定的通透性，有利于细胞培养中氧气和二氧化碳的交换。培养多采用灌流式，将细胞悬液注入微培养室，待细胞贴壁后，将培养液连续灌入培养室，即时更新营养物质。利用微流控芯片进行细胞培养时，要最大限度地降低流体剪切力对细胞状态的影响。 利用微流控芯片能实现对细胞的分选，细胞裂解，从而对细胞分化增殖状态，细胞应激反应，细胞膜功