第三章—植物组织与细胞培养.ppt

第三章 植物组织与细胞培养;一、植物细胞全能性及分化;1、植物细胞无论是体细胞还是生殖细胞均具有该物种的全套遗传信息； 2、只有在适宜的条件下，植物细胞才具有发育成完整植株的能力； 3、植物每个细胞均具有发育成完整植株的能力。;（二）植物离体细胞的脱分化与再分化 ◆细胞分化 由于细胞的分工而导致细胞结构和功能的改变，或发育方式改变的过程。 ◆细胞脱分化 一个成熟细胞回复到分生状态或胚性细胞状态的现象。即失去已分化细胞的典型特征。;◆细胞再分化 脱分化的分生细胞重新恢复细胞分化能力，沿着正常的发育途径，形成具有特定结构和功能的细胞。 细胞再分化的两种途径 大多数培养物是从器官发生的途径再生植株的。;愈伤组织的形态发生方式主要有不定芽方式和胚状体方式两种。 不定芽方式是在某些条件下，愈伤组织中的分生细胞发生分化，形成不同的器官原基，再逐渐形成芽和根。 胚状体方式是由愈伤组织细胞诱导分化出具有胚芽、胚根、胚轴的胚状结构，进而长成完整植株。这种由愈伤组织中的薄壁细胞不经过有性生殖过程，直接产生类似于胚的结构，叫做胚状体。 ;例如： 1958年，美国Stewarol用野生胡萝卜游离韧皮部细胞进行体外培养，使已高度分化的细胞重新分裂，回复至胚性细胞状态。 ;胚性细胞 多细胞团 形态建成 完整植株;外植体 愈伤组织;二、植物体细胞胚胎发生 ;1、是离体培养的产物 2、起源于非合子细胞 3、发育过程与合子胚相似，也经历球形期、心形期、鱼雷期和子叶期阶段; 在植物组织培养中，诱导体细胞胚胎发生与诱导器官发生相比具有显著的特点：;（二）体细胞胚胎发生途径 胚状体可从离体培养的各种外植体上直接或间接地发生，大致分为五种：;（三）体细胞胚胎起源 大多数体细胞胚起源于单细胞 体细胞胚发生的实质是细胞分化 （四）体细胞胚胎的生理隔离 生理隔离是体细胞胚发生的先决条件;（五）体细胞胚胎的遗传稳定性和变异性 通过体细胞胚发生途径形成再生植株是相对稳定的，其发生过程中变异是广泛存在的。 体细胞胚发生潜力的实现和通过这一途径最终繁育出的无性系，保持细胞染色体组的相对完整性是重要的基础。;三、影响植物细胞形态发生的因素;1、培养基 ◆生长调节类物质 ◆营养成分 ◆渗透压 ◆pH值 ◆固态或液态;3、器官、组织类型 ◆不同种植物的器官、组织产生的愈伤组织的器官分化（能力）明显不同，差异显著 ◆材料的基因型决定;4、个体发育年龄 ◆幼嫩部位易诱导形成愈伤组织，也易诱导器官分化 ◆愈伤组织继代次数越多，器官分化能力愈低;一、植物离体无性繁殖的概念和意义;（二）植物离体繁殖的意义 1、繁殖速度快，经济效益高 2、占用空间小，不受季节限制，便于工厂化育苗 3、繁殖各种珍稀、濒危苗木和突变体， 为育种服务;;;;三、离体无性繁殖的方法和影响因素;2、增殖 ◆繁殖体的增殖阶段 ◆无菌母株在无菌条件下离体繁殖扩增 ◆外源激素积累的问题 ;3、植株再生 ◆继代增殖小芽转移至生根培养基中诱导根分化 ◆形成具根、茎、叶的完整小植株 4、炼苗和移植 ◆炼苗驯化过程逐步过渡 ◆无菌状态转为自然状态 ◆恒定状态转变为多变状态 ;炼苗与移栽;（二）影响因素;3、外植体 ◆外植体材料来源丰富程度 ◆成苗是否容易 ◆在培养中的遗传稳定性 ◆试管苗是否整齐一致; 1、污染 A、来源 ◆材料表面消毒不彻底 ◆无菌操作中外界环境进入培养容器造成 B、危害 ◆初代培养失败、增殖速度慢、生长速度慢、玻璃化加剧 ◆成活率低、病毒和病菌的扩散、培养物的遗传变异;C、种类 a、细菌性污染 ◆培养基某一位置或培养材料周围出现黏液状物或浑浊的水渍状痕，有时呈发酵状泡沫。接种后1 ~ 2天可见。 ◆材料、培养基灭菌不彻底 ◆操作不当;白色念珠菌污染：（倒置） ;b、真菌性污染 ◆主要是霉菌污染