干旱胁迫对小麦幼苗生理生化指标的影响.doc

题目：植物生理学实验 姓名：******** 学号：********** 院系：生命科学学院 专业：******** 干旱胁迫对小麦幼苗生理生化指标的影响 专业：****** 学号：*********姓名：******** 摘要： 本实验以小麦幼苗为材料，设置对照组，探究了干旱胁迫下脯氨酸（pro）、谷胱甘肽(GSG)、丙二醛(MDA)、H2O2的含量变化以及抗氧化酶(POD、PPO)活性的变化。结果表明：在干旱胁迫下，脯氨酸（pro）、谷胱甘肽(GSG)、丙二醛(MDA)、H2O2的含量相对于对照组均有较明显的上升趋势，POD和PPO活性也表现出较大水平的提高。 关键词：小麦；干旱胁迫；发芽率；生理生化指标 引言： 干旱、盐碱和低温是强烈限制作物产量的三大非生物因素, 其中干旱造成的损失最大, 其损失超过其他逆境造成损失的总和。干旱是我国农业可持续发展面临的主要问题之一，解决这一问题显得尤为重要。因此在这方面的研究工作开展许久，也取得了许多成果。 小麦是典型的受干旱胁迫影响的植物，小麦是我国北方地区的主要粮食作物，但是近几年随着气候的变化，小麦产量安全问题日益突出。小麦的生长不仅受到自身遗传物质的控制，还受到众多环境因子的影响，如光、温、水和土壤营养物质等，而小麦生育后期干旱常常是限制我国北方地区小麦生长和发育的两个主要环境胁迫因子。干旱对小麦的生理、生化都产生重要的影响，进而影响小麦的生长发育、产量和品质。因此，为了减小环境对小麦生产的影响，有必要从小麦的各项生理生化指标含量的变化，来研究干旱胁迫对小麦的影响，从而找到合适的方法来解决干旱胁迫问题，解决小麦生产安全问题提供理论依据。 1 材料与方法 1.1实验材料的选取和培养 各取50粒吸胀的玉米种子，沿胚的中心线切成两半（严格区分两个半粒）， 进行下列实验： 其中50个半粒进行TTC染色（30℃水浴 20 min） 另50个半粒进行曙红染色（室温染色10 min） 根据两种方法的染色情况， 分别计算发芽率。 1.2干旱胁迫处理 选取一定数量的小麦种子，小麦出苗后，生长达到一定程度后选出长势一致的小麦幼苗，取出矮小和长的高的植株，把长势一致的小麦幼苗分成实验组和对照组， 将实验组进行干旱处理； 对照组小麦苗仍然用蒸馏水浇灌继续培养。 处理结束后，把小麦幼苗转移到26℃下恢复培养7天，每天光照12h，观察对比实验组和对照组小麦苗生长差异变化情况。 1.3测定抗逆指标含量 1.3.1测定抗逆指标抗氧化酶(POD)的含量 运用紫外分光光度法测定。 （1）提取： 分别取对照组和实验组小麦苗0.1 g作为实验材料，加入少许石英砂和3 ml提取液（50mmol/L PBS, pH6.0,内含0.１mmol/ LEDTA, 1%PVP），充分研磨后完全转入离心管中，再用2 ml提取液洗研钵，5000 rpm离心10 min ， 取上清液并测量体积，用于测定POD和PPO酶活性。 　 （2）POD测定：取POD反应混合液（10mmol/L愈创木酚，5 mmol/L H2O2,用PBS溶解）2.95ml，加入酶液50 μl（空白调零用PBS取代），立即记时，摇匀， 读出反应2 min时的A470。 （3）PPO测定：取PPO反应混合液（20 mmol/L邻苯二酚，用PBS溶解）2.9 ml， 加入酶液0.1 ml（空白调零用PBS取代），立即记时，摇匀，读出反应2 min时的A410。 以每分钟A值变化0.01所需要的酶液的量为一个活力单位（U）， 则： POD activities = (?mol.g-1FWmin-1) PPO activities = (U.g-1FW) 1.3.2测定抗逆指标脯氨酸（Pro）的含量 运用紫外分光光度法测定。 （1）提取： 分别取0.1 g实验组和对照组的小麦幼苗，加入3 mL 3%磺基水杨酸（SSA）和少许石英砂，充分研磨后用2 mL 3% SSA冲洗研钵，用离心机5000 rpm离心10 min ，取其上清液量体积。 （2）测定：取上清液各2 mL，分别加入2 mL冰乙酸和2 mL茚三酮试剂，水浴煮沸15 min，冷却后再5000 rpm离心10 min（若没沉淀可略此步骤），分别测定A520。 Pro co