微生物的培养与应用课件3.pptVIP

第六十八课时　分解纤维素的微生物的分离 ;考点一　分解纤维素的微生物的分离;3．筛选纤维素分解菌的方法是 。该方法可以通过 反应直接筛选。 其原理是：刚果红可以与纤维素形成 ，当纤维素被 分解后，红色复合物无法形成，出现以 为中心的 ，我们可以根据 来筛选纤维素分解菌。 4．纤维素分解菌大多分布在富含 的环境中，也可以将富含纤维素的物质埋在土壤中，经过30天左右，再从已腐烂的物质埋藏处筛选 。;5．在将样品稀释涂布到 的培养基上之前，可以用 增加纤维素分解菌的浓度。培养时要在 培养。 6．常 用 的 刚 果 红 染 色 法 有 两 种：一 种 是 ，再加入 ；另一种是 。 7．为确定得到 的 是 纤 维 素 分 解 菌，尚 需 进 行 的实验，纤维素酶的发酵方法有 发酵和 发酵两种。纤维素酶的测定方法一般采用对纤维素酶分解滤纸等纤 维 素 后所产生的 进行定量测定。;【知识拓展】;2．两种培养基 (1)纤维素分解菌的选择培养基——液体培养基;(2)鉴别纤维素分解菌的培养基——固体培养基;3．实验流程;4.两种常用刚果红(CR)染色法的比较;　特别提醒 (1)纤维素分解菌的选择培养基为液体培养基，因培养基中无凝固剂，利用液体选择培养基以增加纤维素分解菌的浓度。 (2)能产生纤维素酶的微生物能以纤维素作为碳源和能源，在培养基中正常生长，其他绝大多数生物不能正常生长。 (3)鉴别培养基因含有琼脂，为固体培养基，刚果红染色法就是应用的此培养基。 (4)为确定得到的菌是否是纤维素分解菌，还需进行发酵产纤维素酶的实验。纤维素酶的发酵方法有液体发酵和固体发酵两种。纤维素酶的测定方法，一般是对纤维素酶分解滤纸等纤维素后所产生的葡萄糖进行定量测定。;【典例精析】 ;(2)如何证明选择培养基没有被杂菌污染??? (3)在用平板计数法对分离的纤维素分解菌数目统计时，统计的菌落数往往比活菌的实际数目低，这是因为： (4)如果探究温度对纤维素酶活性的影响，自变量是 ，应该保持 等不变。;【考查类型】本题考查分解纤维素的微生物的分离实验有关的知识。 【解析】(1)欲证明该培养基是否起到了选择作用，可将碳源由纤维素粉换为葡萄糖，若在后一种培养基上生长的菌落更多，则可表明前一种培养基起到了选择作用。 (2)欲证明选择培养基未被杂菌污染，可将一未接种的选择培养基置于与接种培养基相同条件下培养，如果未接种的选择培养基上无菌落生长，则表明培养基未被杂菌污染。 (3)由于一个菌落可能由两个或多个连在一起的细胞共同繁殖所产生，故统计的菌落数可能会低于实际活菌数。;(4)若要探究温度对纤维素酶活性的影响应以温度作自变量，而纤维素酶量、反应时间、pH等条件均属无关变量。 【方法归纳】(1)稀释涂布平板法统计的菌落数往往比活菌的实际数目低。这是因为当两个或多个细胞连在一起时，平板上观察到的只是一个菌落。 (2)判断某个选择培养基是否具有选择作用时，应设立牛肉膏蛋白胨基础培养基进行对照；若判断所使用的培养基灭菌是否彻底，应设立不接菌种的该培养基进行空白对照。在微生物的分离及培养中经常用到这两种对照。;课时练习七十 一、选择题(每小题只有一个正确选项);2．纤维素酶可以将下列哪种物质分解( ) A．牛肉片 B．鱼片 C．滤纸条 D．塑料条 3．下列不属于纤维素酶组分的是( ) A．C1酶 B．CX酶 C．葡萄糖苷酶 D．半乳糖苷酶;4．从土壤中分离获得某种微生物的步骤是( ) ①土壤取样　 ②梯度稀释　 ③选择培养　 ④涂布培养