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微生物的培养与应用;微生物的接种 ;接种工具和方法;单个细胞;㈡.纯化大肠杆菌;; 原因:
一旦划破,会造成划线不均匀,难以达到分离单菌落的目的;
二是存留在划破处的单个细胞无法形成规矩的菌落,菌落会沿着划破处生长,会形成一个条状的菌落。;答:操作的第一步灼烧接种环是为了避免接种环上可能存在的微生物污染培养物;每次划线前灼烧接种环是为了杀死上次划线结束后,接种环上残留的菌种,使下一次划线时,接种环上的菌种直接来源于上次划线的末端,从而通过划线次数的增加,使每次划线时菌种的数目逐渐减少,以便得到单个菌落。划线结束后灼烧接种环,能及时杀死接种环上残留的菌种,避免细菌污染环境和感染操作者。;2.在灼烧接种环之后,为什么要等其冷却后再进行划线?;C;将菌液进行一系列的梯度稀释,然后将不同稀释度的菌液分别涂布到琼脂固体培养基的表面,进行培养。
在稀释度足够高的菌液里,聚集在一起的微生物被分散成单个细胞,从而能在培养基表面形成单个的菌落。;2.稀释涂布平板法的操作方法;(2)涂布平板操作;注意1.将涂布器末端浸在盛有体积分数为70%的酒精的烧杯中。取出时,要让多余的酒精在烧杯中滴尽,然后将沾有少量酒精的涂布器在火焰上引燃。
2.操作中一定要注意防火!不要将过热的涂布器放在盛放酒精的烧杯中,以免引燃其中的酒精。
讨论:涂布平板的所有操作都应在火焰附近进行。第2步应该如何进行无菌操作?;三、微生物的恒温培养;菌落;几种菌落及其形态;几种菌落及其形态;四、结果分析与评价 ;3、培养12 h和24 h后,观察到的实验结果相同吗?如果不同,请分析产生差异的原因。
菌落的大小不同,菌落分布位置相同。原因是时间越长,菌落中细菌繁殖越多,菌落体积越大。
4、如果你在培养基上观察到了不同形态的菌落,你能分析出可能是由哪些原因引起的吗?
说明有杂菌污染。可能原因:灭菌不彻底、接种过程或培养过程中有杂菌污染。;㈠.培养基的制作是否合格
如果未接种的培养基在恒温箱中保温1~2d后无菌落生长,说明培养基的制备是成功的,否则需要重新制备。
㈡.接种操作是否符合无菌要求
如果培养基上生长的菌落的颜色、形状、大小基本一致,并符合大肠杆菌菌落的特点,则说明接种操作是符合要求的;如果培养基上出现了其他菌落,则说明接种过程中,无菌操作还未达到要求,需要分析原因,再次练习。
㈢.是否进行了及时细致的观察与记录
培养12h与24h后的大肠杆菌菌落的大小会有明显不同,及时观察记录的同学会发现这一点,并能观察到其他一些细微的变化。;菌种的保藏;本课题知识小结:
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