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07 实验七 微生物生理生化反应观察
实验七 微生物生理生化反应观察p.220-225);一.实验目的;二. 原理:;2.明胶是由胶原蛋白水解产生的蛋白质,在25℃以下可维持凝胶状态,以固体形式存在,而在25℃以上明胶会液化。如果接种的微生物能够产生明胶酶,它可将明胶水解成小分子物质,破坏其交替状态,使明胶生化管在25 ℃以下发生液化,据此性质可以鉴别产明胶酶的微生物。
;3. 许多细菌含有脲酶,尿素酶能将培养基中尿素分解成氨、二氧化碳和水,产生的氨累积在培养基中,使加有酚红酸碱指示剂的营养琼脂由中性变成碱性,从而产生颜色变化(由黄色变成深粉红色)。通过生化管的颜色变化就可以判断接种的培养基是否产生尿素酶。(注:在空气中放置一段时间后上部变红,原因空气氧化);4、有些微生物能够分解葡萄糖或乳糖产生有机酸(乳酸、醋酸、丙酸)使生化管的pH值降低,从而使含酸碱指示剂溴甲酚紫(pH5黄-pH7紫)的营养琼脂由紫色变成黄色,通过生化管的颜色变化可以判断是否能产生相应的糖水解酶类。
;三、实验步骤;2.明胶水解实验:每2人接种二支明胶生化管(分别接种大肠杆菌和金黄色葡萄球菌),37℃培养2天,从37℃取出即观察和记录各管的明胶水解情况,得出结论。
大肠杆菌是阳性对照菌。
;3.尿素水解实验:每2人接种两支尿素生化管(分别接种变形杆菌和金黄色葡萄球菌),37℃培养2天,观察和记录每管培养前后颜色变化,得出结论。
变形杆菌是阳性对照菌。
;4、葡萄糖发酵试验:每2人接种二支葡萄糖生化管(一支接种大肠杆菌、一支接种变形杆菌),37℃培养2天,观察和记录每管培养前后颜色变化,得出结论。
大肠杆菌和变形杆菌均是阳性。
;5、乳糖发酵试验:每2人接种二支乳糖生化管(一支接种大肠杆菌、一支接种变形杆菌),37℃培养2天,观察和记录每管培养前后颜色变化,得出结论。
大肠杆菌能分解乳糖和葡萄糖产酸并产气;
普通变形杆菌分解葡萄糖产酸产气,但不能分解乳糖。
;四、实验注意事项;实验报告要求
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