2-2土壤中尿素的细菌的资料.ppt

;【目标导航】　1.能利用选择培养基分离细菌。2.能运用活菌计数法测定土壤中尿素、细菌的数量。;一、研究思路 1．筛选菌株 (1)PCR技术要用到一种关键酶—— ，这种酶只能在耐 环境的微生物中获得。 (2)微生物筛选的原理是：人为提供有利于 生长的条件(包括 、 、pH等)，同时 或阻止其他微生物的生长，该类培养基是 。;2．(1)在稀释涂布平板法和平板划线法两种方法中， 适合统计样品中活菌的数目。该方法要求对样品的稀释度要 ，确保一个菌落来源于 。 (2)用于活菌计数的平板要形成 个菌落。所统计的菌落数往往比活菌的实际数值要 ，原因是 连在一起时观察到的仅是一个菌落。 3．设置对照：目的是排除实验组中 对实验结果的影响，提高实验结果的 。;二、实验设计 1．操作步骤：土壤取样→ →微生物的 。 2．土壤取样一般要铲去 ，因为绝大多数细菌分布于距地表约 的土壤层。;3．样品的稀释：不同的微生物需要稀释的倍数不同，请填写下表 4. 微生物的培养与观察 微生物的生长受 的影响，菌落的数目和 是观察的主要内容。;三、操作提示 1．无菌操作：取土样用的 和盛土样的 都要进行灭菌。称取土样要在 旁进行。稀释样品要在 旁操作。 2．做好标记：要对 和试管进行标记，尤其进行系列稀释时要按照 顺序将试管排列成行。;判断正误： (1)选择培养基只允许特定的微生物生长，而抑制或阻止其他微生物的生长 (　　) (2)对活菌进行计数时，所做的平板越大越好 (　　) (3)设置对照实验可以排除一些非测试因素对实验结果的影响 (　　);(4)从土壤中取样时，土层越浅越好 (　　) (5)来自土壤的微生物稀释度数越大越好 (　　) 答案　(1)√　(2)×　(3)√　(4)×　(5)×;四、课题延伸 分解尿素的细菌合成的 将尿素分解成氨，使培养基的碱性增强。在以 为唯一氮源的培养基中加入 指示剂培养细菌，若指示剂变 ，可确定该种细菌能够分解 。;一、选择培养基 1．选择培养基的制作方法 (1)在培养基全部营养成分具备的前提下，依据某些微生物对某些物质的抗性，在培养基中加入某些物质，以抑制不需要的微生物，促进所需要的微生物生长，如培养基中加入高浓度食盐时可抑制多种细菌的生长，但不影响金黄色葡萄球菌的生长，从而可将该菌分离出来；而在培养基中加入青霉素时可抑制细菌、放线菌的生长，从而分离得到酵母菌和霉菌等。;(2)通过改变培养基的营养成分达到分离微生物的目的：培养基中缺乏氮源时，可分离自生固氮微生物，非自生固氮微生物因缺乏氮源而无法生存；培养基中若缺乏有机碳源则异养微生物无法生存，而自养微生物可利用空气中的CO2制造有机物生存。 (3)利用培养基的特定化学成分分离特定微生物：如当石油是唯一碳源时，可抑制不能利用石油的微生物的生长，使能够利用石油的微生物生存，从而分离出能消除石油污染的微生物。;(4)通过某些特殊环境分离微生物：如在高盐环境中可分离耐盐菌，其他菌在盐浓度高时易失水而不能生存；在高温环境中可分离得到耐高温的微生物，其他微生物在高温环境中因酶失活而无法生存。;2．结果分析与评价;选择培养基的筛选作用;1．伊红—美蓝培养基为什么不是选择培养基？ 答案　伊红美蓝只能显示有无大肠杆菌，而不能只允许一种微生物生存而抑制或影响其他微生物的生存，所以伊红－美蓝培养基不是选择培养基。 2．一种自养微生物与多种异养微生物混合在一起，如何将自养微生物选择出来？ 答案　用不含有机碳源的培养基进行培养，因为自养微生物可以利用空气中的CO2而异养微生物不可以，所以能在培养基中生存的就是自养微生物。;3．2013年11月22日凌晨3点，青岛黄岛区发生石油泄漏事件，一些微生物可以有效地分解石油，如何配制选择培养基将这类微生物选择出来？ 答案　配制的选择培养基中，石油作为唯一的碳源，然后用这种培养基培养多种微生物，凡是能在该种培养基