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2-2土壤中尿素的细菌的分离和计数_资料
*;*; 1、实例:;2、实验室中微生物的筛选原理:;15.0g;;(二)统计菌落数目:
1、方法
运用稀释涂布平板来统计样品中的活菌数
2、原理:
1个菌落→1个活菌
3、统计原则
①选 30~300 个菌落的平板统计
②每个稀释度取3个平板取其平均值; 例:两位同学用稀释涂布平板法测定同
一土壤样品中的细菌数。从对应稀释倍数为
106的培养基中,得到以下两种统计结果。
1、甲同学在该浓度下涂布了一个平板,统计的菌落数为230。
2、乙同学在该浓度下涂布了A、B、C三个平板,统计的菌落数分别为21、212、256,该同学以这三个平板上菌落数的平均值163作为统计结果。
你认为这两位同学的作法正确吗?如果有问题,错在哪?;计算公式;2、显微镜直接计数:;设置对照的主要目的:
是排除实验组中非测试因素对实验结果的影响,提高实验结果的可信度。;小结:通过这个事例可以看出,实验结果要有说服力,对照的设置是必不可少的。;二.实验的具体操作
㈠.土壤取样
从肥沃、湿润的土壤中取样。先铲去表层土3cm左右,再取样,将样品装入事先准备好的信封中。
◆取土样用的小铁铲和盛土样的的信封在使用前都要灭菌。
㈡.制备培养基:
制备以尿素为唯一氮源的选择培养基。;◆应在火焰旁称取土壤10g。
◆在稀释土壤溶液的过程中,每一步都要在火焰旁进行;㈣.取样涂布;㈤.微生物的培养与观察;微生物的培养与观察;*;四.结果分析与评价
1.通过对照实验,若培养物有杂菌污染,菌落数偏高;若培养物混入其他氮源,则菌落形态多样,菌落数偏高,难以选择出分解尿素的微生物。
2.提示:选择每个平板上长有30—300个菌落的稀释倍计算每克样品的菌数最合适。同一稀释倍数的三个重复的菌落数不能相差悬殊,如相差较大,表示实验不精确。;五.课外延伸
在以尿素为唯一氮源的培养基中加入酚红指示剂。培养某种细菌后,如果PH升高,指示剂将变红,说明该细菌能够分解尿素。;大肠杆菌呈 黑色中心 ,有或无金属光泽;本课题知识小结:
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