2015-2016高中生物专题2课题3纤维素的微生物的分离新人教版选修1资料.ppt

微生物的培养与应用;课题3　分解纤维素的微生物的分离;课 堂 合 作 探 究;;1.简述纤维素酶的种类及作用。 2．掌握从土壤分离某种特定微生物的操作技术。 3．分析分离分解纤维素微生物的实验流程。;一、纤维素与纤维素酶 1．纤维素 (1)化学组成：由__________三种元素组成，是地球上含量最丰富的________类物质。 (2)分布及作用：________是自然界中纤维素含量最高的天然产物，此外木材、作物秸秆等也富含纤维素；纤维素是构成植物________的主要组成成分之一。 (3)某些商品纤维素 ①水溶性的________________________(CMC—Na) ②不溶于水的________________(Avicel); 2．纤维素酶 (1)组成：纤维素酶是一种________，包括三种组分，即________、________、___________。 (2)作用：C1酶和Cx酶使纤维素分解成___________，______________，将纤维二糖分解为________。;二、纤维素分解菌的筛选 1．方法：________染色法。 2．原理 (1)含纤维素的培养基中加入的________，可与纤维素形成________________； (2)当纤维素被________分解后，形成的________、________不和刚果红发生这种反应，红色复合物就无法形成，培养基中出现以________________为中心的透明圈，可通过是否产生________来筛选纤维素分解菌。;三、实验设计 1．流程 2．纤维素分解菌大多分布在___________的环境中。 3．通过选择培养基可增加纤维素分解菌的浓度。;教材P28“旁栏思考题” 1．本实验流程与课题2的流程的区别为：课题2是将土样制成的菌悬液直接涂布在以尿素为唯一氮源的选择性培养基上，直接分离得到菌落。本课题通过选择培养，使纤维素分解菌得到增殖后，再将菌液涂布在选择培养基上。其他步骤基本一致。; 2．由于生物与环境的相互依存关系，在富含纤维素的环境中，纤维素分解菌的含量相对提高，因此从这种土样中获得目的微生物的几率要高于普通环境。 3．将滤纸埋在土壤中能使纤维素分解菌相对聚集，实际上是人工设置纤维素分解菌生存的适宜环境。一般应将纸埋于深约10cm左右腐殖土壤中。 ;教材P29“旁栏思考题” 1．方法一：缺点是操作繁琐，加入刚果红溶液会使菌落之间发生混杂；优点是这样显示出的颜色反应基本上是纤维素分解菌的作用。方法二：优点是操作简便，不存在菌落混杂问题。缺点是由于培养基中还含有淀粉类物质，可以使能产生淀粉酶的微生物出现假阳性反应；有些微生物具有降解色素的能力，它们在长时间培养过程中会降解刚果红，形成明显的透明圈，与纤维素分解菌不易区分。 2．在选择培养的条件下，可以使那些能够适应这种营养条件的微生物得到迅速繁殖，而那些不适应这种营养条件的微生物的繁殖被抑制，因此可以起到“浓缩”的作用。;;1.原理：刚果红能与培养基中的纤维素形成红色复合物，但并不和水解后的纤维二糖和葡萄糖反应。当纤维素被纤维素酶分解后，该复合物无法形成，培养基中会出现以纤维素分解菌为中心的透明圈。 2．目的：通过颜色反应直接筛选微生物。;3．方法与比较; 鉴定纤维素分解菌时，可以使用刚果红对其染色，常用的刚果红染色法有两种，一种是先培养微生物，再加入刚果红进行颜色反应；另一种是倒平板时就加入刚果红。两种染色法的结果是 A．均会出现透明圈 B．均不会出现透明圈 C．方法一出现，方法二不出现 D．方法一不出现，方法二出现 [解析]　两种刚果红染色法虽然程序不同，但最终都会使培养基中出现以纤维素分解菌为中心的透明圈。答案为A。 [答案]　A;纤维素分解菌的筛选原理是(　　) A．刚果红可以与纤维素形成红色复合物 B．刚果红可以与水解后的纤维二糖和葡萄糖形成红色复合物 C．刚果红可以与纤维素酶形成红色复合物 D．刚果红可以与纤维素分解菌结合形成红色复合物 [答案]　A [解析]　刚果红是一种染料，它可以与纤维素形成红色复合物，但并不和水解后的纤维二糖和葡萄糖发生这种反应。刚果红也不与纤维素酶或纤维素分解菌结合形成红色复合物。;1.实验原理;2．实验流程; ②设置对照 将上述操作过程中的选择培养基改为不含纤维素的培养基，如牛肉膏蛋白胨基础培养基，其余过程均与①过程相同。; (3)梯度稀释 用1mL无菌吸管从选择培养其中吸取1mL培养液注入盛有9mL无菌水的试管中，吹吸三次，使充分混匀；再用一支1mL无菌吸管从此试管中吸取1mL菌液注入另一支盛有9mL无菌水的试管中。以此类推配制成101、102、103、104、105、106倍的各种稀释液。;(4)涂布培养 ①将鉴别培养基三个平板分别用记号笔写上