植物生理学实验 叶绿体色素的提取、分离.pptVIP

植物生理学实验 叶绿体色素的提取、分离.ppt

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实验6 叶绿体色素的提取、分离;实验目的;一、原理;二、材料、仪器设备及试剂;三、实验步骤;2. 叶绿体色素的分离 (1)取圆形定性滤纸一张(直径11cm),用毛细滴管吸取或玻棒蘸取乙醇叶绿体色素提取液点于滤纸中心,使色素扩散,风干后,再重复操作数次。 (2)用吸管吸取推动剂滴在滤纸中间,当推动剂前沿接近滤纸边缘时,即可看到分离的各种色素。风干滤纸,剪取一条分开的色素带,标明各种色素的位置及颜色,作为结果贴于实验报告上。;3 铜代反应 取上述色素乙醇提取液少许于试管中,1滴1滴加入浓盐酸,观察颜色变化。然后加醋酸铜晶体少许,酒精灯上慢慢加热溶液,观察色素颜色的变化。;叶绿素是一种酯,因此不溶于水。通常用含有少量水的有机溶剂如80%的丙酮,或者95%乙醇,或丙酮∶乙醇∶水=4.5∶4.5∶1的混合液来提取叶片中的叶???素,用于测定叶绿素含量。 之所以要用含有水的有机溶剂提取叶绿素,这是因为叶绿素与蛋白质结合牢,需要经过水解作用才能被提取出来。;卟啉环中的镁可被H+所置换。当为H+所置换后,即形成褐色的去镁叶绿素。 去镁叶绿素中的H+再被Cu2+取代,就形成铜代叶绿素,颜色比原来的叶绿素更鲜艳稳定。 根据这一原理可用醋酸铜处理来保存绿色标本。;

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