植物组织培养33018324.pptVIP

植物组织培养 plant tissue culture;植物组织培养; 指植物的离体部分（包括任何器官、组织、细胞或原生质体），在人工控制的培养基及环境条件（温度及光照）下，得以生长和分化成完整植株的一种无菌培养技术。 ;基础知识;植物组织培养的概念;二、植物组织培养的由来及发展;1937年，美国科学家White等人改进了培养基，结果培养的细胞开始分裂，堆积成一团菜花状瘤状物，即愈伤组织，但没能继续分化为根、茎、叶等器官。后来研究发现，只有在培养基中加入适当比例的细胞分裂素和植物生长素，愈伤组织才能分化出芽和根。;;1967年Maths发现白杨在组织培养过程中，产生的化学物能抑制霉及细菌的生长。Khanna和Staba从悬浮或静止培养基中分离植物组织，发现其中具有抗微生物（抗菌剂活跃）活性者高达百分之八十。　　　　　　　　　　　 1971年，Ra-jasekbar认为组织在不同情况下培养，会产生不同的代谢产物以影响组织的生长。 ;三、植物组织培养的原理;四、植物组织培养的应用 ;一、组培设备 ;1、准备室 仪器和设备 ； 药品 ;2、接种室;上海和呈仪器制造有限公司 CO2培养箱;3、培养室;4、练苗室;获取 外植体;（一）、涉及的基本概念;愈伤组织; 3.再分化redifferentiation 新形成的愈伤组织，经过一段时间的培养，会产生一些分生细胞团，随后由它再分化为具有特定结构和功能的组织或器官，如根和不定芽。 4. 胚状体embroid 对应于胚embryo，在离体培养过程中产生一种形似胚（具有明显的根端和芽端），功能与胚相同的结构。 ;;二、植物组织培养程序;离体、消毒的植物器官、组织或细胞;（二）具体流程简介;植物组织培养的培养基;1.大量元素--C.H.O. N. P. K. Ca. Mg. S. Cl 2.微量元素--Cu. Mo. Zn. Mn. Co. B. Na 3.微生素类--b1(盐酸硫胺素)、b6(盐酸砒哆醇)、生物素、烟酸、叶酸 4.铁盐 Fe. ;母液、糖水;2、外植体选取与灭菌 选材考虑因素： 取哪部分器官或组织最合适 部分器官或组织的生理状态，发育年龄 取材季节 材料大小 外植体的两种类型： A.带芽的外植体如茎尖和侧芽 B.分化的组织：茎段，叶，根，花瓣等 ;无菌操作间 ;兰花嫩茎;外植体表面灭菌 从室外带回来的材料．除去一些不必要的部分．洗去泥土．然后用皂液或洗衣粉及消洗灵浸泡，冲洗，必要时可用软刷刷洗材料，然后剪成适宜的大小，再行深灭菌。通过表面灭菌可清除许多杂菌，如在马蹄莲根茎的离体培养中，通过清洗根茎外植体的泥土，剥去外面几层包庇物，流水冲洗1小时，可把杂菌清洗掉60％左右（Merel LG, 1998）。;外植体的深灭菌 通过外植体表面灭菌后，仍有一部分杂菌存在于材料表面或内部，必须经过更深层次的的灭菌处理如加消毒药剂、抗生素、水浴、灼烧等措施才能获得不带菌的外植体。下面是几种典型外植体的深灭菌处理程序。 ;外植体灭菌： 要去除材料上的微生物，又不能伤及材料。 常用灭菌剂：乙醇（70%—75%）、次氯酸钠溶液（0.5%—10%）、升汞（0.1%—1%）、抗生素类杀菌剂等。 一般可将材料冲洗干净后，放入70%酒精中数秒，用无菌水冲洗后再放入升汞（1—10min）或次氯酸钠中（5—30min）消毒。再用无菌水反复冲洗四、五遍，可达到灭菌目的。不同植物不同部位都有各自的特点，即使同样的植物组织，由于栽培条件或季节不同，污染情况也不同。灭菌方式也有所差异。可参照相似植物的灭菌或是通过实验得到最适灭菌方式。;3、接种;修剪外植体 ;;4、增殖培养; ;蝴蝶兰Phalaenopsis生根苗;;;;植物细胞培养主要几种技术：;植物细胞;例：原生质体培养技术;植物细胞结构图;原生质体培养;本课小结：