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植物组织培养
;第一章 绪 论
植物组织培养
的基础理论和基本知识;一、植物组织培养的基本概念和分类
(一)植物组织培养的概念
&1、植物组织培养又称为植物无菌培养(离体培养、试管培养),指在无菌条件下,将植物的离体器官(根、茎、叶、花、果实、种子等)、组织(花药、胚珠、形成层、皮层、胚乳等)、细胞(体细胞、生殖细胞等)以及原生质体,放在离体无菌条件下,在人工控制的环境条件下,培养在人工配制的培养基上对其进行克隆,使其生长、分化并长成完整小植株的过程。;A Glimpse of
Plant Tissue Culture;2、植物组织培养的分类:
&根据培养的器官不同,分为花药培养、胚珠培养、根培养、茎尖培养、叶培养等;
&根据培养基的形态(培养方式),分为固体培养(在培养基内加入琼脂)和液体培养(也叫液体震荡培养或悬浮培养)两种;;&根据培养物量的多少,分为大量培养、微量培养;
&根据培养过程是否需要光照,分为光培养、暗培养;
&根据培养方法不同,分为平板培养、微室培养、悬浮培养、单细胞培养等。
;补充:悬浮培养又分为振荡培养、旋转培养和纸桥培养
&振荡培养:在培养过程中,将培养基和被培养器官、组织、细胞放入振荡器中振荡而完成的培养过程。主要应用于组织培养和细胞培养。;&旋转培养:在培养过程中,将培养基和被培养器官、组织、细胞放入摇床旋转而完成的培养过程。主要应用于器官脱分化培养。
&纸桥培养:在培养过程中,将培养基中放入滤纸,再将材料置于滤纸上而进行的培养过程。主要应用于植物脱毒茎尖培养。;(二) 植物组织培养的生理依据;;3、植物生长调节物质是植物组织培养中的关键性物质:IAA(诱导愈伤组织形成、诱导生根)、CTK(诱导生芽)、GA(促进已分化芽的伸长生长)、ABA、ETH等,用量极少。;补充:
脱分化:指植物的根、茎、叶、花、果实、种子等器官在人工条件下失去原有的状态和功能,恢复到能分裂和增殖细胞的状态(愈伤组织或细胞团)的过程。
再分化:指细胞状态(愈伤组织)再次分化产生分生组织,形成器官状态(丛生芽或胚状体)的过程。
;外植体:在植物组织培养过程中,由植物体上切取的根、茎、叶、花、果、种子等器官以及各种组织和细胞统称为外植体。(大多为多细胞体,均具有分化器官或其他组织的能力)。
愈伤组织:离体的植物器官、组织或细胞,在培养一段时间以后,通过细胞分裂,形成一种高度液泡化、无定形状态、由薄壁细胞组成的排列疏松的组织。
;愈伤组织
(Callus); 植物组织培养过程;(三)植物组织培养的类型;愈伤组织分化的方向;2、器官培养:根、茎、叶、花、果实、种子等均可。
3、胚培养:
拯救胚:避免受精后胚乳发育不良或因种胚与胚乳间不亲和而致使杂种胚夭折,及时分离幼胚接种在无激素培养基上使之直接成苗。;4、细胞和原生质体培养:在组织培养过程中,对单个分离出来的细胞或去掉细胞壁而裸露的原生质体进行培养。
原生质体:指去掉细胞壁的由质膜包裹着的具有生活力的裸露细胞(细胞膜、细胞质、细胞核)。
;二、植物组织培养的发展;1. 探索阶段(1902-1929年);1904年:Hanning胚培养:培养萝卜和辣根菜的胚,得到植株;;2. 组培方法和定义的建立阶段(1930-1939年);1937年:White发现3种B族维生素和IAA对植物生 长有用
1939年:Gautherete培养胡萝卜根小外植体成功
1939年:White培养烟草种间杂种幼茎切段原形成 层成功
1939年:Nobecourt培养胡萝卜根块茎薄壁组织成功
; 组织培养的奠基人; 3. 细胞全能性的证实阶段(1940-1959);1948年:Skoog和崔真培养烟草茎段时,发现腺嘌呤或腺苷可解除生长素对芽生长的抑制作用,腺嘌呤/生长素高,生芽;低,生根;相等,不分化。
1952-1953年:美国科学家Steward F.C.用胡萝卜根的细胞悬浮培养,发现单个细胞能象受精卵发育成胚一样的途径,发育成完整植株。证实了植物细胞全能性学说。
;1952年:Morel和Martin首次报道茎尖分生组织的离体培养,获得无病毒大丽花植株。
1954年:Muir将烟草愈伤组织置于固体培养基上,在其上放一片滤纸,再在滤纸片上放上一 个烟草体细胞,单细胞培养成功。
1956年:Miller分离出Kinetin,Kinetin / 生长素; 4. 组培技术和理论迅速发展阶段(1960-1979);4.1原生质体培养;&日本科学家进行了大约70个植物品种的原生质体培养。
&中国获得了30个以上品种的原生质体再生植株,其中包括难度较大的重要粮食作物和经济作物大豆、水稻、玉米、小麦、谷子、高梁、大麦、棉花、油莱、马铃薯
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