转基因育种的应用和外源基因整合 12种一谭文琛.pptVIP

转基因动物;;转基因植物;;;转基因育种的应用和外源基因的整合  种一谭文琛; ; 自从20世纪70年代重组DNA技术创建到1983年第一株转基因烟草获得以来，至今已有3个科120种植物转基因获得成功。目前，各国已累计批准23种转基因作物商业化应用，种植面积在1000000平方千米以上的作物包括大豆、玉米、棉花和油菜，涉及100多个转化体，13类目标性状，包括抗虫、抗除草剂、抗病、育性改变、品质改良等。从1996-2007年转基因作物累计种植面积达第一次达到690000000平方千米，以67倍的空前速度增长，成为近代史上发展最快的生物技术。 抗除草剂方面2007和2008年种植面积最大的五个国家是美国（占全球一半）、阿根廷、巴西、加拿大、印度 2007年在美国40%的转基因玉米用来生产乙醇 2007发展中国家种植面积占全球转基因作物种植面积的43%。5个主要发展中国家致力于转基因作物，范围涉及亚洲的印度和中国、拉丁美洲的阿根廷巴西、非洲的南非，代表了全球人口40%的26亿人口。;我国转基因作物研究与利用概况;我国是世界上转基因作物第一个商品化种植的国家。国内自行培育的双价转基因烟草的抗虫性达到60%，产量比对照增加15%,产值增加20%，1992年每亩增产200元，遗憾的是由于市场的原因现已不推广。中国转基因作物研究始于20世纪80年代，1986年启动的“863”计划起了关键性的导向、带动和辐射作用。自2001年《农业转基因生物安全管理条例》颁布以来，我国农业部共受理了192家国内外研究单位的安全评价申请1525项，批准转基因生物中间试验456项，环境释放211项，生产性试验181项，发放安全证书424项，涉及了包括水稻、玉米、小麦、大豆、油菜、棉花在内的40多种受体作物，以及包括抗病虫、耐除草剂等10余种性状的转基因生物，促进了农业生物技术研究与产业的健康发展。同时批准发放转基因大豆、油菜、棉花、玉米18个品种的进口加工原料用安全证书，规范了转基因农产品进出口秩序。 ;1997年国产抗虫棉花进入商业化应用以来，我国已成为继美国之后第二个拥有抗虫棉自主知识产权的国家，培育出了系列的抗虫棉新品种，达到国际领先水平。据统计，每公顷抗虫棉可是化学农药用量减少约47千克，生产成本降低20%~23%。年经济效益达50亿元以上。转基因抗虫棉已对我国农业可持续发展做出了巨大的贡献。 中国转基因抗虫水稻也已培育成功，与常规品种相比，转基因抗虫水稻有显著的产量优势，因此，如果在生产上大规模加以利用，可以产生显著的经济效益和社会效益。 ;;目的基因的获取;载体系统及其制造;重组DNA的制备;植物的遗传转化;2.利用基因枪进行基因转化 基因枪介导转化法（Gene gun mediated transformation）利用火药爆炸、高压气体加速、低压气体加速（这一加速设备被称为基因枪），将包裹了带目的基因的DNA溶液的高速微弹直接送入完整的植物或动物组织和细胞中。通过火药爆炸、高压气体加速传输方式对植物细胞进行轰击，通过细胞和组织培养技术，可再生出植株，选出其中转基因阳性植株即为转基因植株；通过低压气体加速，动植物细胞与活体均可进行转殖，活体转殖后基因可于活体上直接表达。 与农杆菌转化相比，基因枪法转化的一个主要优点是不受受体植物范围的限制。而且其载体质粒的构建也相对简单，因此也是目前转基因研究中应用较为广泛的一种方法。;（二）通过原生质体的基因转化;2.PEG法 PEG法最初应用于细胞融合。1982年Kren首先用此法将一段T-DNA转入烟草原生质体中，并获得转化植株。从此，PEG法便广泛用于原生质体基因转化。其作用原理是通过化学法破坏膜透性，使外源DNA进入植物细胞。一般使用40%PEG与原生质体悬浊液按1:2体积混合，室温放置30分钟后，即可完成反应。PEG法可以与电击法相结合，可以打打提高转化效率。;3.显微注射法 显微注射法要求特殊的显微注射装置。需要一台倒置显微镜，一根针尖直径0.3μm左右的注射针和一根吸附针。全部操作在显微镜下进行。取一载玻片，滴一滴原生质样品，在旁边滴一滴质粒DNA。用吸附针轻轻吸住一个原生质体，使含细胞核的一半朝外面，以便注射针穿刺。用注射针吸取少量DNA，注入细胞核，一次注射2pl，注射完毕即可进行培养。;转基因植株的鉴定;;谢谢