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早期腹膜透析在大鼠挤压综合征急性肾损伤实验步骤.doc
早期腹膜透析在大鼠挤压综合征急性肾损伤的实验步骤
1 称重(kg)
2 麻醉:1%戊巴比妥 3-3.5ml/kg 经耳缘静脉缓慢注射
3 分离左颈总动脉,置管
4 抽取5ml动脉血:
① 2ml 放于注射器(动脉血气分析,电解质,乳酸)立即检测
[需要观察的指标:PH、PaO2 PaCO2 BE;K、Ca、Na;乳酸]② 1 ml 放于紫管(血常规、CRP) 立即检测
[需要观察的指标:血红蛋白、血小板、白细胞、红细胞、CRP]
③ 2ml 放于红管(血生化:肝、肾功能,激酶)静置常温30分钟/4摄氏度过夜后离心(3000转10分钟)-20℃冻存
[需要观察的指标:BUN Cr AST ALT CK 肌红蛋白(Mb)]
5 颈外静脉置管:用于补液
6 腹透置管,后抽取40 ml,4.25%的百特腹透液(加热至38℃),通过肝素帽进行腹腔灌洗2次,并观察有无液体渗漏,确定荷包无渗漏。
7 插尿管:留尿液离心取上清液 ,-20℃冻存
8 开始挤压
正常补液组容量组腹透组腹透+容量组假手术组手术挤压0-6h0-6h0-6h0-6h补液0-8h
1ml/kg/h5-8h 10ml/kg/h5-8h
10ml/kg/h腹透6h始 持续2天/8h6h始 持续2天/8h
腹透组 ②容量负荷组 ③腹透+容量负荷组
5h开始补液(10ml/kg) 5h开始补液(10ml/kg)
6h 释压 6h 释压 6h 释压
抽动脉血5ml(同上) 抽动脉血5ml(同上) 抽动脉血5ml(同上)
留尿液2ml(同上) 留尿液2ml(同上) 留尿液2ml(同上)
经腹透管注入4.25% 经腹透管注入4.25%
百特腹透液(38℃)25ml 百特腹透液(38℃)25ml
拔除静脉管,留置动脉管
切口缝合
8h停止补液 8h停止补液
拔除静脉管,留置动脉管切口缝合
0 6 12 24 48 72
下肢活动情况 0 6 12 24
受压后肢近端周径 0 6 12 24
(压迫中心点)
血尿发生情况 0--------------9
(在哪一时点发生血尿 包括死亡者)
尿NAG、NGAL、β-MG检测 0 6 12 24 48
血液检测 0 6 12 24 48
肾脏病理学检测 (NGAL) 24
股薄肌组织学观察 24
置换出的腹透液 6 12 18 24
(BUN Cr 肌红蛋白)
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