-DNA的粗提取和鉴定浅析.pptVIP

DNA的粗提取和鉴定;目的要求;实验思路;实验原理;实验材料和用具;实验用具：铁架台；铁环；镊子；三角架；酒精灯；石棉网；载玻片；玻璃棒；滤纸；滴管；量筒（100ml，一个）；烧杯；（100ml，一个，50ml、500ml各二个）；试管（20ml，二个）；漏斗；试管夹；纱布。 ;二、DNA的粗提取与鉴定的实验设计;(1)先将新鲜的鸡血离心，获得鸡血细胞 (2)在鸡血细胞中加入一定量的蒸馏水，同时用玻璃棒搅拌，过滤后收集滤液即可;（三）去除滤液中的杂质;讨论：为什么反复地溶解与析出DNA，能够去除杂质;（四） DNA的析出与鉴定;2、 DNA的鉴定;（一）案例一：以鸡血为实验材料进行DNA的粗提取;4、课前准备鸡血细胞液;②柠檬酸钠作用;讨论：提取鸡血中的DNA时，为什么除去血液中的上清液？;讨论：;②溶解细胞核内的DNA;讨论：加入蒸馏水的目的？;④滤取含DNA的粘稠物;⑥过滤含有DNA的氯化钠溶液;答：因为DNA不溶于冷酒精，而其他物质可以溶解在酒精中，使含杂质较少的DNA丝状物可以析出,悬浮于溶液中;取两支20 mL的试管，各加入氯化钠的物质的量浓度为0．015 mol／L的溶液5 mL，将丝状物放入其中一支试管中，用玻璃棒搅拌，使丝状物溶解。然后，向两支试管中各加入4mlL的二苯胺试剂。混合均匀后，将试管置于沸水中加热 5 min，待试管冷却后，观察并且比较两支试管中溶液颜色的变化;讨论：;答：整个实验共“两次蒸馏水，三次过滤，两次析出，六次搅拌”;过滤时使用的纱布层数与需用滤液或黏稠物有关，第二次要用其滤出的黏稠物有关，所以要使用多层纱布，第一次和第三次均要用其滤液，使用的纱布为1－2层;③两次析出;讨论：方案二与方案三的原理有什么不同？