【分生】第二章DNA的复制损伤和修复资料.ppt

第二章; 第一节 DNA复制 第二节 DNA损伤 第三节 DNA修复;一个细胞分裂前，必须首先合成细胞内的DNA，产生双倍量的DNA，在细胞分裂时将等量的DNA分配到两个子代的细胞中。;DNA复制 DNA Replication;复制(replication) ——遗传物质的传代，以母链DNA为模板合成子链DNA的过程。;复制;*一、复制的一般特征 *二、DNA复制的酶学 *三、 DNA复制的过程 四、特殊类型的复制 （一）线粒体DNA复制 (D环方式) （二）单链环状DNA的复制 （三）逆转录病毒的基因组复制 ;（一）半保留复制 （二）双向复制 （三）半不连续复制;（一）半保留复制  (semi-conservative replication); ; 半保留复制 (semi-conservative replication); ; ; 半不连续复制 (semidiscontinuous replication);* 二、DNA复制的酶学;解旋酶(helicase) 利用ATP供能，作用于氢键，使DNA双链解开成为两条单链。;单链DNA结合蛋白（single-strand DNA binding protein, SSB) 在复制中维持模板处于单链状态并保护单链的完整。;DNA旋转酶 (topoisomerase Ⅱ, 拓扑异构酶Ⅱ ）: 既能水解 ，又能连接磷酸二酯键 改变DNA超螺旋状态，理顺DNA链; ;拓扑酶的作用方式：;拓扑异构酶Ⅱ作用机制：; DNA复制过程中的酶 (1) RNA引物酶 (2) DNA聚合酶 (3) DNA连接酶; (1) RNA引物酶： DNA复制起始时，RNA引物酶结合到3’-5’模板链的复制起始点，催化合成与模板DNA 3’端互补的一段RNA引物。;（2）DNA聚合酶 ;全称：依赖DNA的DNA聚合酶 (DNA-dependent DNA polymerase) 简称：DNA-pol; ; ;功能：;323个氨基酸;DNA-pol Ⅱ（120kD）;DNA-pol Ⅲ (250kD); ;(3) DNA连接酶(DNA ligase); ;DNA连接酶在复制中起最后接合缺口——连接DNA双链中的单链缺口。 在DNA修复、重组及剪接中也起缝合缺口作用。 也是基因工程的重要工具酶之一。;;* 三、 DNA复制的过程 （以原核细胞为例）; 复制起点(origin of replication):;5’; ; ; ; ;复制的延长：领头链连续复制，随从链不连续复制（冈崎片断）; ;复制过程简图;复制叉(replication fork) ：;先导链的合成：;;同一复制叉上领头链和随从链由相同的DNA-pol催化延长 ;阶段一;复制子(replicon)：; ; ; ;真核生物每个染色体有多个起始点，是多复制子复制。 复制有时序性，即复制子以分组方式激活而不是同步起动。 酵母：自主复制序列 ;2. 真核生物复制过程;增殖细胞核抗原（proliferation cell nuclear antigen，PCNA）; ;染色体DNA呈线状，复制在末端停止。 复制中岡崎片段的连接，复制子之间的连接。 染色体两端DNA子链上最后复制的RNA引物去除后留下空隙。; ; ;端粒酶催化作用的爬行模型 ; ;;（二）单链环状DNA的复制 噬菌体DNA按滚环方式(rolling circle replication)复制; ;逆转录酶(reverse transcriptase) ; ; 核苷类似物 （AZT: 3’-叠氮胸苷） 非核苷类似物 HIV-1蛋白酶抑制剂 ;复习题;DNA损伤 DNA Damage ;;一、DNA损伤类型;（一）自发突变;（二）外源性损伤;２．化学因素 　（1）碱基类似物　 　（2）碱基修饰剂 （亚硝酸、羟胺、烷化剂）　　　　　　　　　　 　（3）ＤＮＡ插入剂;（１）碱基类似物　;（2）碱基修饰剂（亚硝酸、羟胺、烷化剂）　;羟胺;烷化剂;　　　　　　　　　 （3）ＤＮＡ插入剂;补充知识：; ;３．根据密码子遗传信息改变分类： 　　同义突变、错义突变、无义突变 　　; ;二、DNA损伤在药物中的评价;三、 DNA损伤与抗生素菌种诱变 诱变育种提高抗生素产量 常用的诱变剂： UV、X射线和r射线等， 烷化剂 天然碱基类似物（5-FU、5-BU等） 移码突变剂（吖啶黄、吖啶橙等） ;;复习题;第三节 DNA修复;*一、复制修复 *二