滑子菇菌种制作.docVIP

滑子菇菌种制作、保藏及使用 滑子菇菌种生产流程： 蔗糖、麦芽糖、浓缩酵母、水 配制 装三角瓶 玉米芯、甜菜根、麸皮、酵母、碳酸钙、水 灭菌 配制 母种 液体菌种培养基 装瓶 培养 灭菌 液体菌种A 液体菌种B 固体菌种培养基 培养 固体菌种（原种、栽培种） 检验、保藏、使用 液体菌种制备 培养基使用的化学试剂及所占比例： 蔗糖 2.0% 麦芽糖 1.0% 浓缩酵母 0.4% 液体培养基的制作步骤： 按照制作量及原料配比称取各成分的重量 将原料充分在水中溶解 将所配溶液的温度降至室温 用1.0%的盐酸溶液将培养液的PH值调整至5.8~6.0之间 将培养液倒入装有磁棒的三角瓶中，用瓶塞将瓶口塞好，并使用锡箔纸包好瓶塞及瓶口，塞子与瓶壁之间不能留有空隙 放入蒸汽灭菌锅中杀菌，温度达121℃，灭菌20分钟 母种的制备 用PDA培养基制作平板PDA，将试管斜面的母种接种到PDA平板的中央，在20℃温度的条件下培养，培养10天左右，形成以接种母种为圆心的菌落 种菌 接种前，用0.1%的苯扎溴铵溶液将三角瓶擦拭消毒，将瓶口用酒精灯火焰灼烧灭菌，轻轻打开瓶塞，同时将接种钩灼烧灭菌，在无菌操作下，取适量的母种接种到液体培养基中，（母种取用方法，用灭菌后的接种钩在菌落边缘5mm以内处，选取菌丝浓密的起毛菌丝作为菌种，大小2mm*2mm）接种完毕后，盖上瓶塞，并用锡箔纸包好（注意松紧度），在瓶上标注菌种名称、培养开始日期。整个过程中要特别注意防止杂菌污染，科学规范操作。 液体菌种培养条件 培养条件：温度19~20℃，适度67% 培养过程及溶液的变化 接种入母种后1~2天，有少量白色小碎屑状物悬浮于溶液中，培养液橙黄透明 接种后第3天，产生少许菌丝和菌丝球，溶液橙黄透明 接种后第4~5天，菌丝和菌丝球数量明显增多，有大量菌丝或菌丝球悬浮于溶液中，培养液显深黄色，略显不透明 转瓶接种培养 方法：为了加快并扩大培养量，将以上培养完毕的液体菌种进行转瓶接种。用吸管吸取待接种液体培养基体积1%~2%的液体菌种，在无菌操作状态下，滴入培养液中，进行培养 培养3~4天后，溶液中形成大量的菌丝和菌丝球，颜色深黄色或黄褐色，即可接种入固体培养基中（颜色变为乳白色浑浊状则为杂菌污染，作废弃处理） 液体菌种的检测 用灭菌后的吸管吸取0.1ml的液体菌种，滴入PDA平板培养基中央，用弯玻璃棒将其均匀涂布于表面，盖上培养皿盖。标注菌种接种日期、名称、检测日期。放置于22~24℃的条件下培养6~7天，检查表面是否有杂菌污染，并测定菌落数量（菌落数量在1000~1500个/ml之间，PH值在5.4~5.6之间） 固体菌种制作 固体菌种培养基的配制原材料及比率 原料 玉米芯 ： 甜菜根 ： 麸皮 ： 酵母 ： 碳酸钙 比率 83 ： 5 ： 12 ： 0.03 ： 0.001 预定含水率：66.5% 杀菌后PH值：5.3~5.8 制作步骤 对原材料进行确认，要求新鲜、干燥、无霉变、无杂质，玉米芯粒度在5mm以下 根据生产量计算并称取原材料，玉米芯的粒度要求1.7mm~5mm占70%，1.7mm以下占30%，甜菜根提前加自身重量4~6倍的水浸泡。麸皮、酵母、碳酸钙称取好，加入玉米芯中，作为干料先一起搅拌均匀 次日，将浸泡好的甜菜根，倒入提前拌好的干料中，边搅拌边加入甜菜根，同时，加入提前备好的水，是所有的原料充分混合，搅拌均匀。然后，测定湿料水分含量，使之在66.00%左右，偏差较大，进行调整。PH值杀菌前在6.5左右，如有偏差，用生石灰或者磷酸二氢钾进行调节，杀菌后在5.5~5.8之间。 将搅拌好的原料进行装袋，每袋充填量在800g左右，将表面用压料板压平，直径为2cm的打孔棒打两个孔至料底部，切勿将袋子底部打破，保持袋壁整洁。最后将袋口折叠。 制作完毕后，进行杀菌。 种菌 杀菌完毕的培养基冷却后进行