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秀丽隐杆线虫的饲养及研究用途;介绍; 饲养与冻存;M9缓冲液——每升缓冲液中含15.12gNa2HPO4#12H2O(或6gNa2HPO4),3gKH2PO4,5gNaCl,0.25gMgSO4#7H2O,宜现用现配
S缓冲液——0.1mol/LNaCl,0.05mmol/L K2HPO4-KH2PO4缓冲液(pH=6.0);喂养方法
用冰M9缓冲液清洗虫体
置4℃环境20min
1000r离心,弃上清,沉淀物用M9缓冲液重悬
置4℃环境20min 弃上清
取200ul沉淀物以靠接法接种到涂有大肠杆菌OP50的NGM培养基上
将培养基放置到16℃生化培养箱中,72h后可繁育至第二代
;冻存
准备1mlEP管,加入700ul30%甘油(s缓冲液溶解)
用冰M9缓冲液清洗虫体
置4℃环境20min,1000r离心弃去上清
将虫体转入事先准备好的EP管中,置于-80℃冰箱冻存(可保存2个月),需要时取出室温解冻重置培养基
;研究方法及用途;研究范围; 方法 —— 线虫基因显微注射;设备;;注射步骤; 琼脂糖固定垫; 恢复缓冲液; 注射;子代目的基因表达检测;显微注射后的整合; 整合;细胞程序性死亡的遗传调控机制;
线虫PCA关键阶段;低氧应答模式生物;相关机制;m i R N A 作用机制的研究;其他方面;本次汇报结束,谢谢
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