hsamiR626对Hep G2细胞中载脂蛋白a表达影响.pdfVIP

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2016-07-23 发布于安徽
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目录主要缩略语英文索引 1 中文摘要 2 ABSTRACT 4 前言 6 第一部分生物信息学预测 9 1. 原理 9 2. 方法 9 2.1 LPA mRNA 3’-UTR 序列获取及其二级机构分析 9 2.2 Targetscan 预测以 LPA 为靶基因的 miRNAs 9 2.3 miRanda 预测以 LPA 为靶基因的 miRNAs 10 2.4 MiRBD 预测以 LPA 为靶基因的 miRNAs 10 2.5 PITA 预测以 LPA 为靶基因的 miRNAs 10 3. 结果 11 3.1 LPA mRNA 3’-UTR 序列及其二级结构 11 3.2 Targetscan 预测结果 11 3.3 miRanda 预测结果 12 3.4 MiRBD 预测结果 13 3.5 PITA 预测结果 13 小结 13 第二部分降 apo(a)miRNAs 的实验筛选和靶基因验证 14 1 主要试剂 14 2 主要仪器与器材 15 3.实验方法 15 3.1 高表达 apo(a)细胞株的选取 15 万方数据 3.2 细胞培养 16 3.3 蛋白提取 16 3.4 Western blot 16 3.5 转染效率检测 18 3.6 检测转染 miRNA mimics 对 apo(a) mRNA 表达水平的影响 18 3.7 转染 miRNA mimics 后检测 apo(a)蛋白水平 22 3.8 转染 miR-626 Inhibitor 检测 apo(a)蛋白表达水平 23 3.9 靶基因验证实验 24 4 实验结果 26 4.1 高表达细胞株选取 26 4.2 转染效率检测 26 4.3 转染 miRNA mimics 后检测 apo(a) mRNA 水平 27 4.4 转染 miRNA mimics 后检测 apo(a)蛋白水平 30 4.5 转染 miR-626 Inhibitor 检测 apo(a)表达水平 34 4.6 靶基因验证实验 35 讨论 36 结论 39 参考文献 40 文献综述 43 硕士期间已发表和接收论文 54 致谢 55 万方数据主要缩略语英文索引缩略语英文全称中文译名 As atherosclerosis 动脉粥样硬化 apo(a) apolipoprotein(a) 载脂蛋白(a) apoB-100 apolipoprotein B-100 载脂蛋白 B-100 ASO Antisense Oligonucleotide 反义寡核苷酸 bp base pair 碱基对 BSA bovine serum albumin