芪蛭皱肺颗粒对LPS致炎肺泡Ⅱ型上皮细胞抗菌肽表达的影响.pdf

目 录 中文摘要1 ABSTRACT3 缩 略 词 表5 前 言6 第一部分 立题依据8 1 中医对慢性阻塞性肺疾病的研究概况8 1.1 中医对慢性阻塞性肺疾病的认识8 1.2 中医对慢性阻塞性肺疾病病因病机的认识8 1.3 慢性阻塞性肺疾病的中医治疗10 2 现代医学对慢性阻塞性肺疾病的研究概况13 2.1 概述13 2.2 慢性阻塞性肺疾病的病因及发病机制13 2.3 慢性阻塞性肺疾病的西医治疗进展13 3 非药物对慢性阻塞性肺疾病的治疗概况15 3.1 戒烟15 3.2 氧气疗法16 3.3 机械通气疗法16 3.4 手术与和肺康复治疗16 4 中西医结合对慢性阻塞性肺疾病的研究概况16 5 肺泡 II 型上皮细胞的研究进展16 5.1 肺泡 II 型上皮细胞的概述17 5.2 肺泡 II 型上皮细胞的的作用17 5.3 肺泡 II 型上皮细胞在 COPD 发病中的作用及其研究进展 18 6 抗菌肽 LL-37 的研究进展 19 6.1 概述19 6.2 抗菌肽的抑菌作用19 6.3 抗菌肽在炎症反应中的作用20 6.4 抗菌肽在免疫反应中的作用21 6.5 抗菌肽的作用机制22 万方数据 7 芪蛭皱肺颗粒研究进展23 8 实验研究的目的24 第二部分 实验研究26 实验技术路线图26 实验一 肺泡Ⅱ型上皮细胞的原代分离、培养以及鉴定27 一 实验材料与试剂27 1 实验动物27 2 实验试剂与配制27 2.1 试剂准备27 2.2 试剂配制27 3 主要实验仪器及设备28 二 实验方法28 1 造模方法28 1.1 肺泡 II 型上皮细胞的原代分离与培养28 2 肺泡 II 型上皮细胞的形态学观察和鉴定28 2.1 细胞形态学观察细胞超微结构28 2.2 AT-II 细胞的鉴定 29 三 实验结果29 1 小鼠 AT-II 的一般形态、纯度及活力29 2 肺泡 II 型上皮细胞的鉴定30 2.1 透射电镜观察30 2.2 HE 染色 30 2.3 碱性磷酸酶染色30 2.4 改良巴氏染色30 实验二 芪蛭皱肺颗粒对 LPS 致炎 AT-II 炎症因子的影响 31 一 实验材料与试剂31 1 实验细胞31 2 实验用药31 3 ??验试剂31 4 主要实验仪器与设备31 万方数据 二 实验方法31 1 LPS 造模31 2 芪蛭皱肺颗粒分组与干预32 3 LDH 检测细胞活力 32 4 ELISA 检测 TNF-α 32 5 数据处理及统计学分析32 三 实验结果33 1 不同浓度的 LPS 对 AT-II 细胞增殖活力的影响 33 2 不同浓度的芪蛭皱肺颗粒对致炎 AT-II 细胞生长活力的影响33 实验三 芪蛭皱肺颗粒干预致炎 AT-II 中 LL-37 的 mRNA 表达 36 一 实验材料与试剂36 1 实验细胞36 2 实验用药36 3 实验试剂36 4 主要实验仪器与设备36 二 实验方法36 1 准备 RT-PCR 所需细胞 36 2 LL-37 基因表达的检测 36 3 数据处理及统计学分析39 三 实验结果39 实验四 芪蛭皱肺颗