参苏饮对肺气虚外感小鼠肺组织β防御素2的影响及机制研究.pdf

摘 要 目的 研究参苏饮对“肺气虚外感”小鼠肺组织 β-防御素-2 表达与 TLR4/NF-κB 信号通路的相关性。 方法 1.以“烟熏联合气管注射 LPS”的方法复制“肺气虚外感”小鼠模型，测定 模型小鼠的一般状况、体重、肺指数、脾指数、胸腺指数的变化，并结合肺部病 理组织形态学变化，判定模型的成功复制； 2.“酶联免疫吸附测定(ELISA)”测定参苏饮对“肺气虚外感”小鼠肺泡灌 洗液 BD-2 含量的影响； 3.“免疫组化（SP 法）”测定参苏饮对“肺气虚外感”小鼠肺组织 TLR4、 NF-κBp65、BD-2 蛋白表达的影响； 4.“实时荧光定量 PCR（qRT-PCR）”测定参苏饮对“肺气虚外感”小鼠肺 组织 TLR4、NF-κBp65、BD-2mRNA 表达的影响。 结果 1. “烟熏联合气管注射 LPS”对小鼠一般状况、体重、肺指数、脾指数、 胸腺指数的影响 烟熏后动物活动逐渐减少、皮毛无光泽、松散发黄、精神萎靡、 拉稀样便；肺脏病理组织学检测显示：空白组小鼠肺脏层胸膜无结缔组织增生、 增厚、无结构性破坏，支气管无炎症表现；模型组肺脏层胸膜结缔组织增生、增 厚，肺小支气管及血管周围可见炎细胞围管浸润，肺间质轻度炎症。模型组动物 体重增长缓慢，烟熏 15 天后与空白组相比有显著差异（p0.01）； 20 天造模完成 后模型组肺、脾、胸腺重量与空白组相比有显著差异（p0.05）。 2. 参苏饮对“肺气虚外感”证小鼠肺泡灌洗液 BD-2 含量的影响 与空白组 比较，各组肺泡灌洗液中 BD-2 含量均显著升高（P0.05）；与模型组相比，全方 I 万方数据 组肺泡灌洗液中 BD-2 含量均显著下降（P0.05），益 气解表组、止咳化痰组差异 无统计学意义（P0.05）。 3. 参苏饮对“肺气虚外感”小鼠肺组织 TLR4、NF-κBp65、BD-2 蛋白表达 的影响 与空白对照组比较，模型组小鼠肺组织中 NF-κB p65、BD-2、TLR4 蛋 白的含量均显著升高（P 0.05）；与模型组比较，全方组、益气解表组、止咳化 痰组小鼠肺组织中 NFκB p65、BD-2、TLR4 蛋白的含量均显著地下降（P 0.05）； 全方组、益气解表组、止咳化痰组之间无统计学差异（P0.05）。 4. 参苏饮对“肺气虚外感”小鼠肺组织 TLR4、NF-κBp65、BD-2mRNA 表达的影响 与空白对照组比较，模型组小鼠肺组织中 NF-κB p65 mRNA、BD-2 mRNA、TLR4 mRNA 的含量均显著升高（P 0.05）；与模型组比较，全方组、 益气解表组、止咳化痰组小鼠肺组织中 NF-κB p65 mRNA、BD-2 mRNA、TLR4 mRNA 的含量均显著地下降（P 0.05）；全方组、益气解表组、止咳化痰组之间 无统计学差异（P0.05）。 结论 BD-2 是参苏饮能治疗“肺气虚外感证”的物质基础；参苏饮可能通过 TLR4/ NFκB 信