薄层色谱法测定苏丹红.docVIP

薄层色谱法测定苏丹红 试剂和仪器 苏丹Ⅰ、苏丹Ⅱ、苏丹Ⅲ标准溶液，乙醚，正己烷，0.5%羧甲基纤维素钠水溶液，硅胶G，7.5cm*2.5cm玻璃板、毛细管、250mL广口试剂瓶、尺子和铅笔等。 苏丹Ⅰ、苏丹Ⅱ、苏丹Ⅲ标准溶液的配制（提前配制） 分别称取苏丹Ⅰ、苏丹Ⅱ、苏丹Ⅲ各0.5mg，用乙醚溶解后用正己烷定容至50mL，相当于100μg/mL的苏丹红。 展开剂的配制 正己烷+乙醚+氯仿（体积比为7:1:0.5） 薄层板的制备（至少提前一天准备） 取7.5cm*2.5cm左右的载玻片5片，洗净晾干。 在50mL烧杯中，放置3g硅胶G，逐渐加入0.5%羧甲基纤维素钠水溶液8mL，调成均匀的糊状，用滴管吸取此糊状物，涂于上述洁净的载玻片上，用手将带浆的玻片在玻璃板或水平的桌面上做上下轻微的颤动，并不时转动方向，制成薄厚均匀、表面光洁平整的薄层板，涂好硅胶G的薄层板置于水平的玻璃板上，在室温放置0.5h后，放入烘箱中，缓慢升温至110℃，恒温0.5h，取出，稍冷后置于干燥器中备用。 点样 取1块用上述方法制好的薄层板。分别在距一端1cm处用铅笔轻轻划一横线作为起始线。取管口平整的毛细管插入样品溶液中，在一块板的起始线上点苏丹Ⅰ、苏丹Ⅱ、苏丹Ⅲ标准溶液和混合液4个样点。样点间距0.5-0.8cm。如果样点的颜色较浅，可重复点样，重复点样前必须待前次样点干燥后进行。样点直径不应超过2mm。 展开 用正己烷+乙醚+氯仿（体积比为7:1:0.5）作为展开剂，待样点干燥后，小心放入已加入展开剂的250mL广口瓶中进行展开。点样一端应浸入展开剂0.5cm。盖好瓶塞，观察展开剂前沿上升至离板的上端1cm处取出，尽快用铅笔在展开剂上升的前沿处划一记号，晾干后观察分离的 ，比较样点的Rf值的大小。 数据处理 计算公式： 比移值： Rf = R1/ R2 R1：原点至样品斑点中心之间的距离，cm R2：原点至展开剂前沿的距离，cm 相对比移值： Ris=Rf（i）/Rf（s） Rf（i）是试样至原点的距离?，cm Rf（s）是标样至原点的距离，cm 数据结果记录表 展开剂展开剂距离样品编号样品点距离比移值Rf样品成分　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　 思考题 在一定的操作条件下为什么可利用Rf值来鉴定化合物？ 在混合物薄层谱中，如何判定各组分在薄层上的位置？ 展开剂的高度若超过了点样线，对薄层色谱有何影响？