第三章 薄层色谱法基础.ppt

薄 层 色 谱 法（Thin-layer Chromatography，TLC） ;目 录 ;薄层色谱法通常指以吸附剂为固定相的一种液相色谱法。即将固定相在玻璃、金属或塑料等光洁的表面上均匀地铺成薄层，试样点在薄层的一端，流动相借毛细作用流经固定相,使被分离的物质展开。;薄层色谱与液相色谱法比较 ;薄层色谱与柱层析和纸层析比较 ;比移值（Rf） Rf =原点至组分点中心的距离/原点至流动前沿的距离 组分A的Rf =a/c 组分B的Rf =b/c;三.薄层色谱的操作;(一) 薄层层析用的吸附剂;;层析板是用专门的涂布器把浆状的吸附剂（纸浆、纤维素、硅胶、中性氧化物、聚酰胺、多孔性玻璃粉，硅烷化键合硅胶等）均匀地涂在在薄层板（玻璃板、金属板或弹性塑料板）上，干燥（110℃活化）后即可使用。;1）洗板;2）搅拌;3）涂板 ;4）晾干;(三)薄层层析中展开剂的选择 ;选择薄层条件的简图 ; ; 在具体工作中，展开剂的选择还必须进一步通过实践，一般可用下列三种方法： (1)查阅文献 (2)微型薄层 ：用小玻片铺上薄层，用各种经初步选择认为可能应用的展开剂展开，从而选择适当的展开剂，再用于一般的薄层层析。用微型薄层，节省材料和时间。 (3)微量圆环技术; 将试样溶液点于已准备好的薄层上，点成同样大小的圆点，用毛细管吸取各种经初步选择认为可能应用的展开剂，加到试样点中心，让展开剂自毛细管中慢慢流出进行展开。;(四) 点 样;常用的点样方式; 径向展开与普通展开的区别;4. 点样容器;(五) 展 开;1.水蒸气的影响;2. 溶剂蒸气的影响;3.展开槽;4.展开方式;薄层板;几种新型的展开技术;6 展开操作;展距对结果的影响，硅胶HPTLC 分离洋甘菊油，a）3 cm、b）5 cm、c）7 cm、d）9 cm。;(六)薄层层析的定性检测;1 物理检出法;2.化学检出法;1 通用显色剂 ;3 原位化学衍生化;4 生物与酶检出法(bioautography) ;5 放射显影法（Autoradiography）;(七) 薄层层析的定量测定;1 洗脱测定法 ;吸集器及减压洗脱装置;2 直接测定法;3 仪器测定法;吸收测定法的分类;仪器测定法的两个重要参数 ; ;四 特殊的薄层;1.高效薄层色谱（HPTLC）;2.棒状薄层色谱（Rod-TLC） ;3.超薄层色谱（Ultra Thin-layer Chromatography）;五 应用举例;棒状薄层色谱/氢火焰离子化检测器复杂混峰谱图特征提取方法的研究及应用;新型薄层色谱内标法测定葛根素含量 ;薄层色谱（TLC）与基质辅助激光解吸电离-飞行时间质谱（MALDI-TOF-MS）联用分析大脑中磷脂