我国小麦田杂草抗药性2015-9-26导论.pptxVIP

我国小麦田杂草抗药性;报告内容;植物抗药性（广义）：是指植物能抵抗田间剂量(应注明剂量)条件下除草剂胁迫的遗传能力。包括原先存在的不敏感特性(天然的抗药性即耐药性)和由于除草剂的选择压而丧失敏感性以及基因工程授予作物的抗药性（即耐除草剂转基因作物）。 杂草抗药性（狭义抗药性、获得性抗性）：是指由于除草剂的选择压导致植物丧失敏感性而形成的抵抗除草剂的遗传能力。 天然抗药性（耐药性）：植物自身具备的能够抵抗除草剂伤害而保存自己的遗传能力。;杂草;菵草;Beckmannia syzigachne;种群采集地;Alopecurus japonicus;种群采集地;采集地;生物型;采集地;种群采集地;采集地;[Wang et al. (2011). Agricultural Sciences in China];有研究在江苏采集到4个抗苯磺隆牛繁缕种群，其相对抗性倍数高达203-565倍；在河南也发现了抗苯磺隆的牛繁缕（相对抗性倍数292.5倍）。;在山东麦田发现抗苯磺隆麦家公种群。; 交互抗性：是指一种抗性杂草生物型对两种或多种作用机理相同的除草剂表现抗药性。 多抗性：是指一种抗性杂草生物型对作用机理完全不同的两种或两种以上除草剂表现抗药性。 ;1.3麦田抗药性杂草的交互抗性;抗甲基二磺隆看麦娘种群的交互抗性;1.3 麦田抗药性杂草的交互抗性;;抗性种群;二、麦田杂草抗药性机理;菵草抗性和敏感植株的ACCase活性;菵草抗性和敏感植株的ACCase基因表达量;在抗精噁唑禾草灵菵草中，ACCase基因6个位点碱基突变导致氨基序列变化： 1781：异亮氨酸→亮氨酸 1999：色氨酸→亮氨酸 2027：苏氨酸→半胱氨酸;在抗精噁唑禾草灵看麦娘中发现了ACCase1781位点突变：异亮氨酸→亮氨酸;抗甲基二磺隆日本看麦娘中发现ALS基因197位的脯氨酸突变为苏氨酸;突变为甘氨酸：对ALS抑制剂类的苯磺隆、双氟磺草胺、双氟磺草胺、咪唑乙烟酸均表现出明显抗性； 突变为丝氨酸：对嘧草硫醚、双氟磺草胺具有明显的交互抗性，但对咪唑乙烟酸敏感。;抗精噁唑禾草灵日本看麦娘ACCase氨基酸1999位的色氨酸突变为半胱氨酸可导致对精噁唑禾草灵高抗性和对唑啉草酯低抗性，但对炔草酯、高效氟吡甲禾灵、烯草酮、烯禾啶不产生抗性。;代谢增强导致的抗药性（代谢抗性）是当前我国麦田杂草非靶标抗性研究中较为常见的结论。 主要涉及： 1）添加细胞色素P450氧化酶抑制剂（PBO和ABT）后，抗性种群对精噁唑禾草灵的抗性水平显著下降：因而细胞色素P450参与代谢抗性。 2）抗性种群植株体内的谷胱甘肽转移酶（GST）活性增强：因而GST可能参与了代谢抗性。;三、杂草抗药性治理;3.1 加强杂草抗药性监测;环介导恒温扩增技术（loop-mediated isothermal amplification，LAMP）是2000年由日本学者Notomi开发的一种新颖的恒温核酸扩增技术； 与常规PCR相比，不需要模板的热变性、温度循环、电泳及紫外观察等过程； 具有简单、快速、灵敏度高、特异性强等特点； 十多年来，该技术已广泛应用于各种病毒、细菌、寄生虫等引起的疾病检测、食品化妆品安全检查及进出口快速诊断中，得到了欧美国家的认同，在分子生物学领域具有很大的应用价值。;LAMP技术的可行性：本研究室已在检测小麦田杂草对ACCase抑制剂的靶标抗性中进行突变位点定性。 （下图为LAMP技术检测的显色结果）; LAMP技术能够快速地检测出发生特定位点的靶标酶基因突变，直接通过目测显色结果确定抗药性生物型，但也存在两点局限性：一是确定抗药性生物型后还需生物测定的方法来确定其抗药性水平；二是引物具有特异性，不能检测到之前基因序列分析未发现的靶标突变。;3.1.3 抗药性杂草快速检测方法二： dCAPS技术简介 dCAPS (derived cleaved amplified polymorphic sequence)衍生酶切扩增多态性序列是一种用于快速检测已知突变的分子标记技术。该技术首先通过在引物中引入特殊的酶切位点来对目的片段进行扩增，然后通过限制性内切酶的酶切，最后通过电泳来进行检测。 优点：快速准确；应用范围广；相对廉价且不需要特殊的仪器；能够区分纯合及杂合突变。 缺点：前期需要明确突变位点及其序列信息。 目前实验室状况：本实验室已经建立了对抗性日本看麦娘1781，1999，2027，2041，2078位点氨基酸突变及抗性菵草1781，2027，2041，2078，2096位点氨基酸突变的检测技术。 ;3.2 阻止抗性种子积累;3.3 除草剂的轮用及混用 ;3.4 耕作栽培措施的利用 ;