原核微生物细胞壁导论.pptxVIP

原核微生物细胞型真核细胞原核细胞古细菌真细菌细菌、放线菌、蓝细菌、支、衣、立克次体、螺旋体多细胞真菌——霉菌单细胞真菌——酵母菌原生生物藻类动物和植物真菌非细胞型病毒亚病毒阮病毒主要区别：是否有核膜包裹的细胞核回顾第一节原核微生物原核微生物无核膜的原始单细胞生物一般结构（基本结构）特殊结构鞭毛flagellum菌毛pilus芽孢spore糖被glycocalyx荚膜capsule细胞壁cellwallCW细胞膜cellmembraneCM细胞质cellplasmeCP核质nuclearmaterialNM细菌构造细胞壁（cellwall）是位于细胞最外的一层厚实、坚韧的外被，主要由肽聚糖构成，是细菌细胞壁中特有成分。注意：支原体则是一类无细胞壁的原核生物。原核生物细胞壁：（1）固定细胞外形和提高机械强度，免受渗透压的损伤；如大肠杆菌的膨压为2.03*105Pa，葡萄球菌等G+菌能高它10倍。（2）为细胞的生长、分裂和鞭毛运动所必需；（3）渗透屏障，阻拦酶蛋白和某些抗生素等大分子物质（分子量大于800）进入细胞，保护细胞免受消化酶、溶菌酶和青霉素（限于G-菌）等有害物质的损伤；（4）赋予细菌特定的抗原性（菌体抗原-O抗原）、致病性（磷壁酸吸附）以及对抗生素和噬菌体的敏感性。细胞壁的功能：革兰氏阳性菌的细胞壁特点：厚度大（20~80nm）化学组分简单，一般只含肽聚糖（90%）和磷壁酸（10%）。肽聚糖：又称粘肽(mucopeptide)、胞壁质(murein)或粘质复合物(mucocomplex)，是真细菌细胞壁中的特有成分。磷壁酸：结合在革兰氏阳性细菌细胞壁上的一种酸性多糖目前所知的肽聚糖已超过100种，在这一“肽聚糖的多样性”中，主要的变化发生在肽桥上。肽聚糖：又称粘肽、胞壁质、黏质复合物基本骨架叫聚糖骨架由N-乙酰葡萄糖胺（G）和N-乙酰胞壁酸（M）交替间隔排列，经β—1，4糖苷键联接而成的糖链肽尾（侧链）：短肽(4～5个氨基酸)——M【丙谷赖丙】肽桥（交桥）：1～5个氨基酸（甘甘甘甘甘）（1）肽聚糖第一节原核微生物一、细胞壁革兰氏阳性菌的细胞壁原核生物所特有的已糖双糖单位中的β-1,4-糖苷键很容易被溶菌酶(lysozyme)所水解，从而引起细菌因肽聚糖细胞壁的“散架”而死亡。革兰氏阳性菌的细胞壁（2）磷壁酸革兰氏阳性细菌细胞壁上特有的化学成分，主要成分为甘油磷酸或核糖醇磷酸。分膜磷壁酸和壁磷壁酸。（1）肽聚糖（2）外膜（3）外膜蛋白（4）周质空间（5）粘合位点革兰氏阴性菌的细胞壁埋藏在外膜层之内，是仅由1~2层肽聚糖网状分子组成的薄层(2~3nm)，含量约占细胞壁总重的10%，故对机械强度的抵抗力较革兰氏阳性菌弱。（1）肽聚糖位于G—细菌细胞壁外层，也称为外壁。组成脂多糖(LPS)磷脂（外膜）脂蛋白脂多糖特异多糖核心多糖脂类A菌体(O)抗原内毒素核心成分（2）外膜(outermembrane)位于革兰氏阴性细菌细胞壁最外层的一层较厚（8~10nm）的类脂多糖类物质，由O-特异侧链（O-specificsidechain，或称O-多糖或O-抗原）、核心多糖(corepolysaccharide)和类脂A三部分组成。[1]脂多糖（lipopolysaccharide,LPS）（2）外膜(outermembrane)脂多糖（特别是类脂A）是内毒素毒性部分；嵌合在LPS和磷脂层外膜上的蛋白有20余种，多数功能不清楚。孔蛋白（porins）是由三个相同分子量（36000）蛋白亚基组成的一种三聚体跨膜蛋白，中间有一直径约1nm的孔道，通过孔的开、闭，可对进入外膜层的物质进行选择。非特异性孔蛋白特异性孔蛋白可通过分子量小于800~900的任何亲水性分子只容许一种或少数几种相关物质通过，如维生素B12和核苷酸等。（2）外膜蛋白(outermembranePr)G+G-比较问题革兰氏染色法：如何用化学方法鉴定G+与G-?革兰氏阳性菌：细胞壁主要成分为粘肽，脂质含量少，经高浓度洒精脱色后，细胞壁通透性改变不大，结晶紫-碘复合物仍被保留在细胞内而呈蓝紫色染色结果。革兰氏阴性菌：细胞壁主要成分为脂质，粘肽含量极少，经高浓度洒精脱色后，细胞壁通透性增加，孔隙增大，结晶紫-碘复合物被洗出细胞外，最后被品红复染为红色。问题KOH溶液法鉴别革兰氏阴阳性菌 ：原理：由于革兰阴性细菌的细胞壁肽聚糖层数少，在遇到稀碱溶液时细胞易于破裂并释放出未断裂的核酸，使氢氧化钾菌悬液呈现粘性，用接种环搅拌后菌悬液变得比较粘稠，能拉出粘丝来，而革兰阳性细菌在稀碱溶液中没有上述变化。 方法：取1滴5%KOH水溶液（应新鲜配制）于洁净玻片上，用接种环于固体培养基上取新鲜培养菌落少许，与氢氧化钾水溶液搅拌混匀，并每隔几秒钟上提接种环，观察能否拉出粘丝。 结果：用接种环拉出粘