第一章酶工程概述资料.ppt

酶 工 程;酶工程;酶工程;(一) 酶的生产;CH 1.2 酶工程及其主要研究内容;CH 1.3 酶的历史沿革1 酶学研究简史;;;CH 1.3 酶的历史沿革2 酶工程的发展历程;一、酶在食品方面的应用;2.酶法生产果葡糖浆;3.饴糖的生产;4.酶在蛋白质制品加工方面的应用;鱼制品;5.酶在果蔬加工方面的应用;果汁生产与果胶酶;6.酶在改善食品的品质和风味中的应用;果菜清洗;二、酶在轻工业方面的应用;2.酶在轻工产品制造方面的应用 ;酶水解了毛根部的毛囊蛋白而使毛松动脱落。蛋白酶分解皮纤维间质中的可溶性蛋白质，使皮纤维进一步松散软化。;3.酶作为添加剂 ;酶制剂在国外饲料工业中得到不断应用，不仅提高了饲料原料的转化率，也促进了对饲料的消化。;三 酶在环境监测方面的应用;四 酶在医药方面的应用;1、酶在疾病诊断方面的应用;酶;端粒酶;PKU苯丙酮尿症 脑发育受阻，严重脑力呆滞，智商 0－50;体检表中有关酶的选项;1.根据体内原有酶活力的变化诊断某些疾病;2.用酶测定体液中某些物质的量诊断疾病;二、酶在疾病治疗方面的应用;溶菌酶;凝血酶;三、酶在生物制药方面的应用;4、酶在药物制造方面的应用;青霉素酰化酶与抗生素改造;第三节 酶在分析检测方面的应用;酶法分析：用酶进行物质分析检测的方法称为酶法检测或酶法分析。;一、单酶反应检测;二、多酶偶联反应检测;三、酶标记免疫反应检测;;四、酶在基因工程中的应用; 现代基因工程的创始人P·伯格（美国,1926－）在1960年以敏锐的科学预见力提出一个大胆的设想：是否可以创造出一种人工方法，把外界的遗传基因引入动物体内，以达到改变遗传性状和治疗某些疾病的需要呢？1972年，伯格把两种病毒的DNA用同一种限制性内切酶切割后，再用DNA连接酶把这两种DNA分子连接起来，于是产生了一种新的重组DNA分子，首次实现两种不同生物的DNA体外连接，获得了第一批重组DNA分子，这标志着基因工程技术的诞生。伯格因此获得了1980年诺贝尔化学奖。 ; ;DNA 连接酶 ; 一些限制性核酸内切酶的来源与作用位点; 酶的特性 ;CH 1.1 酶的基本概念 ;;;;;CH 1.1 酶的结构和功能 CH 1.2 酶催化反应的动力学 CH 1.3 酶的分类和命名 CH 1.4 酶活力???念及活力测定 　　 ;CH 2.1 酶的结构和功能 (?１. 酶催化功能的结构基础 );;;;CH 2.1 酶的结构和功能 (?2. 酶催化专一性基本学说 ); 锁 钥 学 说; 诱导契合学说;★丝氨酸蛋白酶的活性中心位于酶分子表面凹陷的小口袋中，口袋的大小以及口袋内的微环境（疏水性、电荷性质）决定了丝氨酸蛋白酶的底物专一性;胰凝乳蛋白酶 ： 口袋较大，主要由疏水氨基酸残基围成，开口较大（由两个Gly组成），因此需要底物有一个疏水基团（芳香环Phe、Tyr、Trp及大的非极性侧链）定位。裂解芳香族氨基酸羧基侧的肽键 胰蛋白酶： 口袋较大，底部有Asp，利于 Lys.、Arg结合，裂解碱性氨基酸残基羧基侧的肽键 弹性蛋白酶： 口袋较浅，开口较小（由Val，Thr组成）只能让Ala等小分进入，裂解小的中性氨基酸残基羧基侧的肽键;;酶催化机理实例—胰凝乳蛋白酶 ★丝氨酸蛋白酶家族具有类似的Ser -His-Asp催化三联体（电荷中继网）。 电荷中继网： Ser195—His57—Asp102氢键体系。通过电荷中继网进行酸碱催化及共价催化。 没有底物时， Ser195—His57—Asp102形成一个氢键体系，His57是去质子化状态， Asp102的COO-通过氢键定位并固定His57。 结合底物时： His57从Ser195接受一个质子，增加了Ser195羟基氧原子对底物的亲核攻击性， Asp102的COO-稳定过度态中His57的正电荷形式。;★ ? 胰凝乳蛋白酶反应的详细机制 ?第一阶段： 酰化 Ser195---OH 中的氧攻击肽键的羰基碳（共价催化），酶的His57咪唑H+与底物中的-NH形成氢键（酸碱催化），形成四联体过渡态（Ser195—O-、底物的羰基C、底物的-NH、His的咪唑H+ ），肽键断裂，氨基产物释放，底物的羧基部分酯化到Ser195的羟基上。 第二阶段： 脱酰 电荷中继网从水中吸收一个质子，结果产生的OH-攻击连在Ser195上底物的羰基C原子，形成四联体过渡态，然后His57供出一个质子给Ser195上的氧原子，底物中的酸成分从Ser195上释放。;;酶催化机理实例—胰凝乳蛋白酶 2.胰凝乳蛋白酶的电荷接力网 ;;酶催化机理实例—胰凝乳蛋