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- 2016-07-26 发布于湖北
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凋亡检测;主 要 内 容;实验原理 ;;Apoptotic DNA Ladder;实验步骤 ;实验步骤 ;每孔加入1.2ml DEX(5mg/ml)混匀, co2培养箱, 370c, 5h ; 离心, 3000rpm, 5min, 去上清(不要回倒, 棉棒沾干液体,勿触及沉淀) ;将上清转入无水乙醇管,颠倒离心管数次可见白色絮状物(DNA);取凝胶到凝胶成像仪上拍照分析;1. 取出胸腺后, 一定要注意将组织去除干净。
2. 样本须先经70%乙醇固定,以防止DNA降解。
3. 70%乙醇, 无水乙醇应-200c预冷。
4.氯仿抽提蛋白时,应用振荡器剧烈振荡,吸移上清时,注意不要将蛋白质层吸动时(宁少勿多,以免蛋白质污染)
5.可根据DNA量的多少加样。
6. 用2% agrose电泳可获较佳分离效果。;
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