第三章病毒和亚病毒2015技巧.ppt

第三章 病毒和亚病毒因子;教学目标;教学内容;第一节 概 述;一、病毒的定义和特性;Field 等（1990年）： 病毒为具有独立于宿主的进化史的绝对细胞内寄生物，它的DNA或RNA基因组被其编码的蛋白质壳体化。 是一类既具有化学大分子属性，又具有生物体基本特征；既具有细胞外的感染性颗粒形式，又具有细胞内的繁殖性基因形式的独特生物类群。;由一个或数个RNA或DNA分子构成的感染性因子，通常（但非必须）覆盖有由一种或数种蛋白质构成的外壳，有的外壳还有更为复杂的膜结构；这些因子能将其核酸从一个宿主细胞传递给另一个宿主细胞；能利用宿主的酶系统进行细胞内的复制；有些还能将其基因组整合入宿主细胞DNA，依靠这种机制，或是导致持续性感染，或是导致细胞转化，肿瘤形成。（沈萍 版，p164）;2、病毒的基本特征;1、大小;;;病毒粒子;核衣壳（nucleo-capsid）病毒主要由壳体和核酸二部分构成，二者统称核衣壳。;包膜（envelope） 在壳体外层还具有一层由病毒编码的封套，有包膜病毒粒子是以出芽的方式穿过被侵染细胞的核膜或原生质膜。 包膜可能含有少量的糖蛋白，例如人类免疫缺陷性病毒(HIV)，也可能含有大量的糖蛋白，例如单纯疱疹病毒(HSV)。病毒的包膜上具有受体，它能使粒子附着并感染宿主细胞。;病毒的对称性 病毒的衣壳具有螺旋体对称或二十面体对称。螺旋体对称可以看作蛋白亚基通过有序的螺旋方式，排列在病毒核酸周围，二十面体是一种有规则的立体结构，它由许多蛋白亚基的重复聚集组成，从而形成一种类似于球形的结构。;1.? Adenovirus structure ;螺旋对称; ;Adenovirus ;3、病毒的化学组成 ;1）病毒蛋白 结构蛋白 构成一个形态成熟的有感染性病毒颗粒所必须的蛋白，包括壳体蛋白、包膜蛋白存在于毒粒中的酶。 非结构蛋白 由病毒基因组编码的，在病毒复制过程中产生并具有一定功能，但不结合于毒粒中的蛋白。; 2）病毒的核酸 双链DNA (dsDNA)、单链DNA (ssDNA)、双链RNA (dsRNA)、单链RNA(ssRNA)； 除dsRNA外，其余有均线状和环状形式； 单链核酸按照它们的极性（polarity）进行分类：+RNA、-RNA； ;病毒;病毒的分类;分类系统:目、科（亚科）、属和种分类阶元构成； 3个目，其中1个尾病毒目（Caudovirales）涉及噬菌体，2个涉及动物病毒，分别是单负股病毒目（Mononegavirales）和套式病毒目（Nidovirirales） 。;种 　 病毒种的命名不是单纯由某一个分类特征、而是由多原则分类特征决定的，包括病毒的基因组组成、病毒颗粒形态结构、生理生化特性和血清学性质等。 属　 病毒属是一群具有某些共同特征的种组成。其属名的词尾为“-virus”，但在设立一个新的病毒属时必需有一个同时被承认的代表种(type species)。 ;科　 病毒科是一群具有某些共同特征的属组成。科名的词尾为 “-viridae”，“科”下面可以设立或不设立亚科。亚科名的词尾为“-virinae”。 目　 病毒目是一群具有某些共同特征的科组成，目名的词尾为 “-virales”。;病毒;病毒的命名与书写规则;第二节 噬菌体(bacteriophage);一、概述;噬菌体;噬菌体种类;吸附(Adsorption) 穿入(Penetration) 脱壳(Uncoating) 生物合成(Biosynthesis) 装配与释放(Assembly and Release); ;吸附于大肠杆菌上的噬菌体 ;二、 噬菌体效价的测定 ;效价(滴度Titre)-------是微生物或其产物、抗原与抗体等活性高低的标志。 噬菌体效价--------指噬菌体的浓度，即每毫升样品含噬菌体的个数。通常是在含敏感菌的平板上形成噬菌斑进行噬菌体的计数，以每毫升中含有的噬菌斑形成单位（plaque forming unit/ml或pfu/ml)表示其效价。 ;噬菌体效价的测定——双层平板法;三、一步生长曲线 ;定量描述烈性噬菌体生长规律的实验曲线。 可反映噬菌体的3个最重要参数： 潜伏期 裂解期的长短 裂解量的大小;高浓度的敏感宿主菌 适量的噬菌体;潜伏期（latentphase）? 指噬菌体的核酸侵入宿主细胞后至第一个噬菌体粒子装配前的一段时间，故整段潜伏期中没有一个成熟的噬菌体粒子从细胞中释放出来。? ?不同病毒的潜伏期长短不同，噬菌体以分钟计，动物病毒和