_第6章+色谱分析法.ppt

色谱法中: 起分离作用的分离柱称为色谱柱。 固定在柱内的填充物称固定相。 携带试样混合物流过此固定相的流体（气体或液体），称为流动相。 1．按两相状态分类 2．按分离过程机理分类 二、色谱法特点 1．分离效能高。 能在较短的时间内对组成极为复杂或组分性质极为相近的混合物进行分离与测定。 2．灵敏度高。 能检出10-11~10-13g的物质，在痕量分析中可检出含量仅为10-4%，甚至10-7%的杂质。 3．分析速度快。 一般在几分钟或几十分钟内完成一个样品的分析。 4．应用范围广。 四、气相色谱常用术语 1．色谱峰 组份从色谱柱中馏出时，检测器响应信号大小随时间变化所形成的峰形曲线叫色谱峰。 2．基线 3．峰高h 色谱的最高点与基线之间的距离AB?。 4．峰宽度Y和半峰宽度Y1/2 自色谱峰的拐点所作的切线，在基线上的截距叫峰宽度Y。 峰高一半处色谱峰的宽度叫半峰宽度Y1/2。 峰宽度和半 峰宽度的单 位由色谱图 横坐标采用 的单位而定。 其单位可以 是时间、体 积或距离。 5．标准偏差σ 0.607倍峰高处色谱峰宽度的一半，如图15-6中EF的一半。 经计算，峰宽Y 4σ，半峰宽Y1/2 2.354σ 6．保留值： 表示试样中各组分在色谱柱内停留时间的长短。通常用时间或相应的载气体积来表示。 （1）用时间表示的保留值 i．保留时间tR：指被测组分从进样开始到出现色谱峰最高点时所需的时间，如图15－6中的O?B所示。 ii. 死时间tM：指不被固定相吸附或溶解的物质（如试样中混入的少量空气、甲烷等）的保留时间。如图15—6中的O?A?所示。 iii．调整保留时间 tR：指扣除了死时间的保留时间。如图15－6中的A?B所示。 即 tR＝tR－tM （2）用体积表示的保留值 i．保留体积VR：从进样到出现色谱峰最高点时所通过的载气体积。 它与保留时间的关系为： VR tR·Fc Fc为扣除饱和水蒸气压并经温度校正的载气流速，常以ml·min-1表示。 ii．死体积VM：色谱柱内除了填充物固定相以外的空隙体积、色谱仪中管路和连接头间的空间以及检测器的空间的总和。后两项较小、可忽略不计。 它与死时间的关系为： VM tM·Fc iii．调整保留体积：指扣除死体积后的保留体积，即 VR VR一VM 或 VR tR·Fc （3）相对保留值r12 也称选择性因子 指组分1与另一组分2的调整保留时间之比。 7．分配系数K 定义: 在一定温度和压力下，组分在固定相和流动相之间分配达平衡时的浓度之比称为分配系数。 8．分配比k 分配容量、容量因子） 定义：在一定温度和压力下，组分在两相之间分配达平衡时，分配在固定相和流动相中的质量比称为分配比k。 k值也决定于组分和固定相热力学性质，它不仅随柱温和柱压变化而变化，而且还与流动相和固定相的体积有关。 9.分配系数K与分配比k的关系 10. 分配比与保留时间的关系 11.分配系数K及分配比k与相对保留值r2,1的关系 五、色谱分析理论（一）塔板理论 最早由Martin提出塔板理论 。 该理论假定： （1）在柱内一小段长度H内，组分可以在两相间迅速达到平衡，这一小段柱长称为理论塔板高度H。 对一根长度为L的色谱柱，溶质平衡的次数为： 塔板理论指出： 第一，当溶质在柱中的平衡次数，即理论塔板数大于50时，可得到基本对称的峰形曲线。 第二，当样品进入色谱柱后，只要各组分在两相间的分配系数有微小差异，经过反复的多次平衡后，仍可获得良好的分离。 第三，n与半峰宽及峰底宽的关系式为： 但由于死时间tM包含在tR中，而tM并不参加柱内的分配，所以理论塔板数、理论塔板高并不能真实地反映色谱柱的好坏。为此： 常用有效塔板数或有效塔板高度作衡量柱效能的指标。计算式如下： 例1．已知某组分峰的峰底宽为40s，保留时间为400s，计算此色谱柱的理论塔板数。 解： 例2．已知1根一米长的色谱柱，有效塔板数为1600块，组分A在该柱上的调整保留时间为100秒，试求A峰的半峰宽及有效塔板高度。 解： （二）速率理论 1956年荷兰学者范第姆特（van Deemter）等在研究气液相色谱时，提出了色谱过程动力学理论—速率理论。 范第姆特方程的数学表达式为： 1．涡流扩散项A 在填充色谱柱中，当组分随流动相向柱出口迁移时，流动相由于受到固定相颗粒障碍，不断改变流动方向，使组分分子在前进中形成紊乱的类似“涡流”的流动，故称涡流扩散，形象地如图15-9。 A 2λdp dP:平均直径 λ:填充不规则因子 上式表明，A与填充物的平均直径dP大小和填充不规则因子λ有关，与流动相的性质、线速度和组分性质无关。 为了减少涡流扩散，提高柱效，使用细而均匀的