第八章 微生物的遗传与育种.ppt

第八章 微生物的遗传与育种;遗传与变异的概念;研究微生物遗传的意义;微生物是研究现代遗传学和其它许多主要的生物学基本理论问题中最热衷的研究对象。 对微生物遗传规律的深入研究，不仅促进了现代分子生物学和生物工程学的发展，而且为育种工作提供了丰富的理论基础，促使育种工作从不自觉到自觉、从低效到高效、从随机到定向、从近缘杂交到远缘杂交的方向发展。;第一节 遗传变异的物质基础;1928年，Griffith进行了以下几组实验： （1）动物实验 对小鼠注射活R菌或死S菌 ————小鼠存活 对小鼠注射活S菌————————小鼠死亡 对小鼠注射活R菌和热死S菌 ———小鼠死亡 抽取心血分离活的S菌;（2）细菌培养实验 热死S菌—————不生长 活R 菌—————长出R菌 热死S菌+活R 菌—————长出大量R菌和10-6S菌;①加S菌DNA ②加S菌DNA及DNA酶以 外的酶 ③加S菌的DNA和DNA酶 ④加S菌的RNA ⑤加S菌的蛋白质 ⑥加S菌的荚膜多糖;（二）噬菌体感染实验;（三）植物病毒的重建实验;选用TMV和霍氏车前花叶病毒（HRV），分别拆分取得各自的RNA和蛋白质，将两种RNA分别与对方的蛋白质外壳重建形成两种杂合病毒： （1）RNA（TMV）- 蛋白质（HRV） （2）RNA（HRV）- 蛋白质（TMV） 用两种杂合病毒感染寄主： （1）表现TMV的典型症状病分离到正常TMV粒子 （2）表现HRV的典型症状病分离到正常HRV粒子。 上述结果说明，在RNA病毒中，遗传的物质基础也是核酸。;二、 微生物的基因组结构;原核生物（大肠杆菌）的基因组;真核生物（啤酒酵母）的基因组;三、原核生物的质粒;2、结构特点 通常以共价闭合环状(covalently closed circle，简称CCC)的超螺旋双链DNA分子存在于细胞中； 也发现有线型双链DNA质粒和RNA质粒； 质粒分子的大小范围从1kb左右到1000kb； 细菌质粒多在10kb以内） ;3、质粒的类型;4、质粒在基因工程中的应用 质粒的优点： （1）体积小，易分离和操作 （2）环状，稳定 （3）独立复制 （4）拷贝数多 （5）存在标记位点，易筛选 E. coli的pBR322质粒是 一个 常用的克隆载体;5、质粒的检测;6、质粒的主要种类;（1）致育因子(Fertility factor，F因子);（2）抗性因子（Resistance factor，R因子）;R100质粒(89kb)可使宿主对下列药物及重金属具有抗性： 汞（mercuric ion ，mer）四环素（tetracycline，tet ）链霉素(Streptomycin, Str)、磺胺(Sulfonamide, Su)、氯霉素(Chlorampenicol, Cm)、夫西地酸（fusidic acid，fus）并且负责这些抗性的基因是成簇地存在于抗性质粒上。;（3）产细菌素的质粒（Bacteriocin production plasmid）;一般都位于质粒或转座子上，因此，细菌素可以杀死同种但不携带该质粒的菌株。;（4）毒性质粒（virulence plasmid）;产毒素大肠杆菌是引起人类和动物腹泻的主要病原菌之一，其中许多菌株含有为一种或多种肠毒素编码的质粒。;Ti质粒中的T-DNA可携带任何外源基因整合到植物基因组中，是植物基因工程中有效的克隆载体;（5）代谢质粒（Metabolic plasmid）;假单胞菌： 具有降解一些有毒化合物，如芳香簇化合物(苯)、农药(2,4dichlorophenoxyacetic acid)、辛烷和樟脑等的能力。;（6）隐秘质粒（cryptic plasmid）;第二节 基因突变及育种;一、基因突变 一个基因内部遗传结构或DNA序列的任何改变、可遗传、自发或诱变产生;（二）基因突变的特点 1、随机性 2、稀有性 3、独立性 4、可逆性 5、稳定性;（三）基因突变随机性的实验证明;（四）基因突变及其机制;1、诱发突变：物理、化学核生物的因素，提高突 变率的人为的作法 （1）碱基的置换;碱基的置换引起的突变;（2）移码突变：添加或缺失核苷酸，引起阅读错误;（3）染色体畸变：缺失、重复、插入、易位、倒位;;2、自发突变：无人为因素下的低频率突变原因： （1）背景辐射 （2）有害产物积累 （3）碱基错配;（五）紫外线对