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- 2016-07-30 发布于湖北
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碱性磷酸酶的动力学分析;酶促反应动力学:研究各种因素对酶促反应速率的影响,并加以定量的阐述。
影响因素包括:酶浓度、底物浓度、pH、温度、抑制剂、激活剂等。;碱性磷酸酶米氏常数的测定;原理;;Vmax; Vmax[S] ;本实验以碱性磷酸酶(AKP)为材料,用磷酸苯二钠为其底物。
AKP催化磷酸苯二钠水解产生游离酚和磷酸盐。酚在碱性溶液中与4一氨基安替比林作用,经铁氰化钾氧化,可生成红色的醌衍生物。
根据红色的深浅可测出酚的含量,进而算出相应的酶活性 (V)。
再根据Lineweaver—Burk法作图,计算其Km值。 ;操作 ;酶促反应速度计算;注意事项 ;实验记录;实验报告碱性磷酸酶米氏常数的测定 日期 室温;(一)绘制米氏方程式曲线;AKP米氏方程式曲线图;(二)绘制双倒数曲线;AKP的双倒数曲线图
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