5.1 DNA的粗提取与鉴定重点.ppt

DNA的粗提取与鉴定 ;目的要求;实验思路;基础知识;（一）DNA的溶解性;（三）DNA的鉴定 DNA遇二苯胺（沸水浴）会染成蓝色，因此，二苯胺可以作为鉴定DNA的试剂。;实验设计;从核DNA数目来看，猪38条，鸡78条，哺乳动物血0条，猕猴桃58条，洋葱16条，豌豆14条，菠菜12条，大肠杆菌1条。请选择动植物材料各一种。 ;②鸡血细胞极易吸水胀破，而用动物肝脏细胞作实验材料常常需要匀浆和离心，对设备要求较高，操作繁琐，历时较长;（二）破碎细胞，获取含DNA的滤液;向制备好的鸡血细胞液中加入蒸馏水，同时用玻璃棒充分搅拌，使血细胞加速破裂。然后，用放有纱布的漏斗过滤。取其滤液。;讨论：为什么反复地溶解与析出DNA，能够去除杂质;1、溶解细胞核内的DNA;讨论：加入蒸馏水的目的？;4、将DNA的粘稠物再溶解;（四） DNA的析出与鉴定;;2、 DNA的鉴定;;答：整个实验共“两次蒸馏水，??次过滤，两次析出，六次搅拌”;过滤时使用的纱布层数与需用滤液或黏稠物有关，第二次要用其滤出的黏稠物有关，所以要使用多层纱布，第一次和第三次均要用其滤液，使用的纱布为1－2层;③两次析出;（二）案例二：以菜花为实验材料进行DNA的粗提取;观察你提取的DNA颜色，如果不是白色丝状物，说明DNA中的杂质较多；二苯胺鉴定出现蓝色说明实验基本成功，如果不呈现蓝色，可能所提取的DNA含量低，或是实验操作中出现错误。;1、在制备鸡血细胞液的过程中，加入柠檬酸钠的目的是（ ） A .防止凝血 B. 加快DNA析出 C .加快DNA溶解 D.加速凝血;2、DNA的溶解度最低时，NaCl的物质的量浓度为（ ） A 2mol/l B 0.1mol/l C 0.14mol/l D 0.015mol/l 3、在向溶解DNA的NaCl溶液中，不断加入蒸馏水的目的是（ ） A 加快DNA溶解的速度 B 加快溶解杂质的速度 C 减小DNA的溶解度，加快DNA析出 D减小杂质的溶解度，加快杂质的析出;4、向溶有DNA的2mol/L的NaCl溶液中不断加入蒸馏水,在这个过程中DNA的溶解度变化情况分别是 A 减小;减小 B 增大;增大 C 先减小后增大 D增大; 减小