氨胺酮诱导PC12细胞凋亡内质网应激机制研究.pdfVIP

氯胺酮诱导??细胞凋亡的内质网应激机制研究摘要．?????受体阻滞剂，可产生剂量相关的意识和感觉分离的麻醉状态，广泛用于成人和小儿麻醉。然而越来越多的研究结果显示，全身麻醉药氯胺酮可导致神经损伤，引起神经退行性疾病和长期的神经认知缺陷。因此对氯胺酮神经毒性的研究引起人们的关注。路、死亡受体通路和内质网通路。有研究报道氯胺酮可通过线粒体途径导致体外培养的人胚胎干细胞发生凋亡，但氯胺酮是否可以通过内质网应激可提高内质网处理未折叠或错误折叠蛋白的能力，维持细胞的生存；如果应激程度过强或时间过长，细胞内的稳态不能恢复，内质网应激最终将导为免疫球蛋白重链结合蛋白??????????，是未折叠蛋白反应的主调控者。当钙超载、氧化应激等因素导致内质网腔中未折叠蛋白聚集时，???疊?释放跨膜蛋白，引起??せ睢?网应激介导凋亡途径的关键蛋白酶。基于以上研究背景，本实验中我们研究氯胺酮对??细胞的毒性作用，观察内质网应激在氯胺酮诱导??细胞损伤的过程中是否发挥了作目的：氯胺酮?????作为一种非竞争性???．???．?已有研究报道氯胺酮可导致啮齿类、斑马鱼、非人类灵长类神经细胞凋亡。细胞凋亡是细胞死亡的主要形式之一，有关细胞凋亡的发生机制尚未充分阐明。现在认为有三条细胞信号通路参与凋亡的发生：即线粒体通???，??途径诱导细胞凋亡还未明确。已有研究表明，氧自由基、应激激素和细胞因子等都可以影响内质网功能，导致未／错误折叠蛋白堆积，激活内质网应激。适度的内质网应激致细胞发生凋亡。在一些神经退行性疾病如帕金森病，阿尔茨海默病和亨廷顿病等的发病机制研究中已证实内质网应激可以引起神经细胞的凋亡。葡萄糖调节蛋白???甼?????珿????脖怀?因此，???疊?被视为??谋曛拘缘鞍住?????是????易?成员，它仅产生于内质网。?????鲈谀谥释??な北换罨??悄谥?用，为氯胺酮神经毒性机制研究提供新的思路。中文摘要???????????????畆??????????? 、?、?州?????单独作用于??细胞?对其存活率无明显影响；?或?州?????可抑制???訮??赴?婊盥实挠跋欤??????鯯?????内质网应激??笛楣鄄霴．??、??、??．??氯胺酮分别作用????激介导凋亡分子?????鞍椎谋泶铮?、??、??氯胺酮作用??氯胺酮作用????双标染色法检测??细胞凋亡率，并观察内质网应激抑制剂?????对氯胺酮所致??细胞凋亡的影响。??萦镁??辣曜疾???±??硎荆?肧????软件进行统计结果：??细胞存活率的变化：与正常对照组相比，???笙赴?婊盥拭挥忻飨员浠?????，作用?、??氯胺酮所致??细胞存活率的下降??．???方法：抑制剂?ザ阑蛴肼劝吠9餐?饔枚訮??赴?婊盥实挠跋臁???????方法检测内质网应激标志分子???疊?、内质网应对??细胞???疊?、?????鞍椎挠跋欤?．??訮??赴鸊??／???????蛋白的影响；加用内质网应激抑制剂?????共同作用于??细胞后对两种蛋白的影响。?A嗣魅仿劝吠J欠竦贾铝薖??赴?牡蛲觯?捎昧魇较赴??学分析，各组均数的比较行单因素方差分析?????詐?．?为差异有统计学意义。?氯胺酮作用于??细胞?后，??细胞存活率明显降低??．???、??、??．??氯胺酮作用于??细胞??????螅琍??赴?婊盥拭飨越档?????，且呈浓度依赖性；?谥释??け曛痉肿覩??／??鞍妆泶锏谋浠?河胝?６哉兆?相比，??、??氯胺酮作用于??细胞??螅珿??／??鞍妆泶?明显增高??．??????，呈浓度依赖性；???氯胺酮作用于??细胞?、??螅珿??／??鞍妆泶锩飨栽龈??????????，呈时间依赖性；???????可抑制???氯胺酮所致??细胞???疊?蛋白表达的增高。内质网应激介导凋亡分子?????鞍妆泶锏谋浠?河胝?６哉兆??螅珻????蛋白表达中文摘要?、? 州?????可抑制??氯胺酮所致??细胞凋亡率的增高??．????軸?????ザ雷?明显增高??．???逝ǘ纫览敌裕?．??螅珻????蛋白表达明显增高??．???适奔湟览敌裕???氯胺酮所致??细胞?????鞍妆泶???细胞凋亡率的变化：与对照组相比，??后??细胞总凋亡率明显升高??．?????????可抑制??用后细胞凋亡率较对照组相比差异无统计学意义??．???关键词：氯胺酮；??细胞；毒性作用；细胞凋亡；内质网应激中文摘要?氯胺酮作用于??细胞??的增高。?氯胺酮作用?结论：氯胺酮可诱导??细胞发生凋亡，且呈浓度依赖和时间依赖性；内质网应激介导了氯胺酮诱导的??细胞凋亡。????、? 篕????琣???????狣???????????．??????．????琣????????猺?????????????????????????瓽??