克隆构建服务重点.ppt

NovobioCustomServices克隆构建服务Chaozheng.xie@2012.02.041原理介绍基因克隆是指通过体外DNA重组技术，将目的DNA经过切割与合适的载体连接，并导入受体细胞形成大量拷贝的过程。目标客户所有的分子生物学/细胞生物学的研究工作者相关主要设备：摇床，无菌操作台，PCR仪2克隆服务简易图3目的基因获得的不同方式PCR产物（针对TA克隆服务）RT-PCR产物（针对ORF克隆和RACE服务）质粒（针对亚克隆和定点突变服务）基因合成4克隆库产品及ORF克隆原理在进行目的蛋白的表达、构建表达载体等实验时，通常需要获得一段目的基因。我们可以根据客户提供的已知参考序列设计引物，以总RNA为模板，获取客户需要的感兴趣的目的基因。5服务流程客户提供：与参考序列物种一致的材料或总RNA：1)实验材料必须保证新鲜，请您采样后立即放入液氮中速冻或加入样品稳定剂；2)基因组DNA/总RNA无明显降解，总量大于5mg。如果基因丰度较低或调取的基因较长，请您提供尽量多的材料。总RNA的提取以总RNA为模板通过RT-PCR扩增得到目的基因目的基因的克隆及测序目的基因亚克隆至表达载体中我们提供：含有目的基因的质粒及菌种6亚克隆及载体构建根据欲改造的已有载体性质、欲改造的结构进行方案设计，可完成已有载体MCS的改造，已有载体启动子、增强子、筛选标记等功能元件的改造；可应客户