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现代生药学概论;第一篇 概论
第二篇 分子生药学研究方法及其基本技术
第三篇 分子生药学的研究领域 ;1 生药及生药学的定义2 生药学的发展历程3 分子生药学产生的背景4 分子生药学定义及其研究对象
5 分子生药学研究内容
6 分子生药学研究的方法
7 分子生药学与相关学科的关系;一、生药及生药学的定义;二、生药学的发展历程;(3)现代生药学新时期:1930年-至今。主要体现在以下方面:
① 生药有效成分研究进一步深入。② 生药鉴定方面应用了电子显微镜和X-射线衍射法观察和研究生药组织的超微结构,免疫电泳法用于种子生药的鉴别,利用各种生药的紫外或红外光谱建立生药的指纹鉴别数据库的研究正在发展之中。③ 药用植物的组织培养,涉及到遗传育种和突变品系等多方面的研究,利用细胞和组织培养方法来生成药用植物的有效物质,已获得进展。④ 分类学研究的发展,通过生药化学成分的研究,作为分类学特征。⑤ 在资源开发利用方面,重视海洋药用生物的研究,并出现海洋生药学。有关生化药效、药效药理评价的临床生药学也已产生。
(4)自然生药学时期(20世纪末):
本时期的最大特点是数理化科学原理与实验技术广泛应用于生药的研究中,使人们从宏观和微观来还原和揭示生药的自然属性。日本学者朝比奈泰彦的话“药学的研究从生药开始,最终又将回到生药的研究”,预示了生药学新时期的到来。;三、分子生药学产生的背景;产生的理由:
(1)1953年Watson和Crick对DNA结构的发现标志着生命科学的发展进入了一个新纪元。;;DNA双螺旋结构模型的生物学意义:第一次提出了遗传信息的储存方式以及DNA复制的分子机理。;(2)分子生物学快速发展并在生物医学各个领域渗透应用,使得一大批交叉学科、边缘学科和前沿学科应动而生,都发展到了分子水平。生药学主要研究动物和植物性生药,涉及到许多生物学的理论和方法,因此生药学也不例外。
(3)生药主要来源于动物和植物,任何植物、动物的每个细胞中都含有储藏、复制和传递遗传信息的物质基础——DNA,这也是分子生物学研究的物质基础,使分子生物学的理论和方法能在生药学中广泛使用。
(4)从生药学研究动物性和植物性生药的层次来看,已逐渐从有机体、组织、器官、细胞发展到基因水平,所以发展生药学的科学现代化,必然要与分子生物学密切联系,理所当然地将生药学的研究推进到分子水平。;四、分子生药学定义及其研究对象;五、分子生药学研究内容;六、分子生药学研究的方法;3.物理学研究方法:包括生药本身的物理性质的测定和在形态、化学、生物活性等方法研究中对物理仪器的使用。药物本身的物理性质包括水分多少、颜色、硬度乃至形态等。水分含量测定,显微镜、电子显微镜对生药的组织形态鉴定等。
4.药效学研究方法:药物的质量控制,最根本指标或称标准是其药效如何。中医理论指导或临床实验指导。;七、分子生药学与相关学科的关系;1 植物DNA方法与技术2 植物RNA方法和技术3 植物基因表达和调控的研究技术——分子杂交核酸分子杂交 Westren杂交4 植物遗传转化技术——植物基因枪转化技术5 与分子生药学相关的Internet应用;植物DNA、RNA的分离技术;CTAB(Cetyltrimethyl Ammonium Bromide 溴化十六烷三甲基铵)法;RFLP技术;DNA多态性根据其产生的方式基本分为两种:一是碱基对突变类型,即限制性内切酶识别位点是发生了单个碱基替换,使原有切点消失或产生新的切点;另一类是结构重排型,这是由DNA内部发生较大的顺序变化引起的。;RFLP分析在分子生药学中的应用;DNA与PCR技术;PCR技术;PCR循环扩增原理示意图;PCR技术在分子生药学中的应用;RAPD技术;RAPD分析在分子生药学中的应用;AFLP技术;AFLP 技术的基本原理是通过对基因组DNA 的限制性酶切片段进行选择性扩增而揭示其多态性,亦即将基因组DNA 经限制性内切酶双酶切后,形成分子大小不等的限制性酶切片段,酶切后的DNA 片段连上接头形成带接头的特异片段,作为PCR 扩增的模板,特异性片段经PCR 扩增,只有那些与引物的选择性碱基严格配对的DNA 片段才能被扩增出来,扩增产物经聚丙烯酰胺凝胶电泳将特异的限制性片段分离。;AFLP在分子生药学中的应用;植物基因表达和调控的研究技术——分子杂交;分子杂交主要包括两大部分内容,一是核酸分子杂交,其中又包括Southern杂交和Northern杂交;二是属于蛋白质分子杂交的Western杂交。二者分别在基因整合、转录和表达的不同阶段对目的基因进行检测和定位。
分子杂交实验主要涉及三大部分的内容:(1)杂交探针的制备;(2)被检的核酸或蛋白质样品制备;(3)印迹及杂交。;Southern杂交;印迹完成后,
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