第五章反胶团萃取1分析.ppt

第六章 反胶团萃取与 双水相萃取 6.1 反胶团萃取 传统的分离方法，如液-液萃取技术，具有操作连续、多级分离、放大容易和便于控制等优点，在化学、化工、石化等领域得到广泛应用。 但很难用于具有某些特殊性质的生化产品(如蛋白质、氨基酸等)的提取与分离，原因在于这类物质多数不溶于非极性有机溶剂，或与有机溶剂接触后会引起变性和失活。 6.1.1 基本术语 反胶团萃取(Reversed micellar extraction)的分离原理: 表面活性剂在非极性的有机相中超过临界胶团浓度而聚集形成反胶团,在有机相内形成分散的亲水微环境。 许多生物分子如蛋白质是亲水憎油的,一般仅微溶于有机溶剂,而且如果使蛋白质直接与有机溶剂相接触,往往会导致蛋白质的变性失活,因此萃取过程中所用的溶剂必须既能溶解蛋白质又能与水分层,同时不破坏蛋白质的生物活性。反胶团萃取技术正是适应上述需要而出现的。 反胶团形成过程及其特性 从胶体化学可知,向水溶液中加入表面活性剂,当表面活性剂的浓度超过一定值时,就会形成胶体或胶团,它是表面活性剂的聚集体。在这种聚集体中,表面活性剂的极性头向外,即向水溶液,而非极性尾向内。当向非极性溶剂中加入表面活性剂时,如果表面活性剂的浓度超过一定值,也会在溶剂内形成表面活性剂的聚集体,称这种聚集团为反胶团。在这种聚集体中，表面活性剂的憎水的非极性尾向外,与在水相中所形成的胶团反向。 下图为几种可能的表面活性剂聚集体的构型。从图中可看出。在反胶团中有一个极性核心,它包括了表面活性剂的极性头所组成的内表面、抗衡离子和水,被形象地称为“水池”。由于极性分子可以溶解在 “水池”中,也因此可溶解在非极性的溶剂之中。 胶团的大小和形状与很多因素有关,既取决于表面活性剂和溶剂的种类和浓度,也取决于温度、压力、离子强度等因素。 典型的水相中胶团内的聚集数是50~100,其形状可以是球形、椭球形或是棒状。反胶团直径一般为5~20nm,其聚集数通常小于50,通常为球形,但在某些情况下,也可能为椭球形或棒状。 实验中观察到,对于大多数表面活性剂,要形成胶团,存在一个临界胶团浓度(CMC),即要形成胶团所必需的表面活性剂的最低浓度。低于此值则不能形成胶团。这个数值可随温度、压力、溶剂和表面活性剂的化学结构而改变,一般为0.1~1.0mmol/L。 反胶束(reverse micelles): 若向有机溶剂中加入一定浓度S，在有机溶剂中就会形成胶束。当形成反胶束时，水在有机相中的溶解随[S]线性增大。因此，可通过测定有机相中平衡水浓度的变化，确定形成反胶团的最低表面活性剂浓度。 反胶束的形态：球形或近似球形，也呈柱状。 极性核(polar core): S分子的自组装形成了极性核。 微水相或“水池”(water pool)：反胶束内溶解的水。 6.1.2 基本性质 内水的性质：当W0较低 (如S = AOT双（2－乙基己基）琥珀酸酯磺酸钠 , W0 = 6-8)时, 微水相的水分子受S亲水基团的强烈束缚, 表观粘度上升50倍, 疏水性也极高。随W0的增大, 这些现象逐渐减弱, 当 W016时, 微水相的水与正常的水接近, 反胶团内可形成双电层。但即使当W0值很大, 水池内水的理化性质也不能与正常的水完全相同, 特别是在接近S亲水头的区域内。 反胶团萃取过程 用反胶团技术萃取蛋白质时,用以形成反胶团的表面活性剂起着关键作用。现在多数研究者采用AOT(阴离子型)为表面活性剂。AOT是琥珀酸二(2-乙基己基)酯磺酸钠或丁二酸二异辛酯磺酸钠(Aerosol OT)。溶剂则常用异辛烷 (2,2,4-二甲基戊烷)。 AOT作为反胶团的表面活性剂是由于它具有两个优点:一是所形成的反胶团的含水量较大,非极性溶剂中水浓度与表面活性剂浓度之比可达50~60;另一点是AOT形成反胶团时,不需要助表面活性剂。AOT的不足之处是不能萃取分子量较大的蛋白质,且沾染产品。如何进一步选择与合成性能更为优良的表面活性剂将是今后应用研究的一个重要方面。 AOT反胶团直径dAOT: 第1项为水核直径，第二项(2*1.2 nm)为二倍AOT分子长度. 一般反胶团的W0不超过40. 因此, 依据上式, 利用ATO形成的水核直径一般不超过12nm, 大致可容纳一个直径为5-10nm的pro分子. 当pro分子比与反胶团直径相比大得多时(如,当M 100-200kD),难于溶解到反胶团中. 6.1.3 反胶束的溶解作用 微水池溶解和分离作用：