叶辉第十章RNA的生物合成(药学)分析.ppt

茎环结构使转录终止的机理： 使RNA聚合酶变构，转录停顿； 使转录复合物趋于解离，RNA产物释放。 2. 非依赖 ρ 因子的转录终止 DNA模板上靠近终止处，有些特殊的碱基序列，转录出RNA后，RNA产物形成特殊的结构来终止转录。 5`UUGCAGCCUGACAAAUCAGGCUGAUGGCUGGUGACUUUUUAGUCACCAGCCUUUUU... 3` 5`UUGCAGCCUGACAAAUCAGGCUGAUGGCUGGUGACUUUUUAGUCACCAGCCUUUUU... 3` RNA 5?TTGCAGCCTGACAAATCAGGCTGATGGCTGGTGACTTTTTAGTCACCAGCCTTTTT... 3? DNA UUUU...… UUUU...… 5`UUGCAGCCUGACAAAUCAGGCUGAUGGCUGGUGACUUUUUAGUCACCAGCCUUUUU... 3` 近终止区的转录产物形成发夹(hairpin)结构是非依赖ρ因子终止的普遍现象。 非依赖ρ因子的转录终止 5?------AAUAAA- 5? ------AAUAAA-- 核酸酶 -GUGUGUG RNA-pol AATAAA GTGTGTG 转录终止的修饰点 5? 5? 3? 3? 3?加尾 AAAAAAA······ 3? mRNA mRNA转录终止 —— 和转录后修饰密切相关。 （二）真核生物转录终止 真核生物RNA转录后的加工 Post-transcriptional Modification 第三节 一、前体mRNA的加工 在真核细胞核内可分离到一类含量很高，分子量很大但不稳定的RNA，称核不均一RNA（hnRNA），比mRNA的平均长度大4-5倍，它是mRNA的前体，含有内含子。 鸡卵清蛋白成熟mRNA与DNA(hnRNA)杂交图 （一）核不均一RNA（hnRNA） （二）真核mRNA的前体加工 1、加帽：5?端帽子结构(m7GpppGp —) 功能： ①使mRNA免受核酸酶的降解，增加mRNA的稳定性。 ②有助于mRNA越过核膜，进入细胞质。 ③使mRNA能与核糖体小亚基结合并开始合成蛋白质。 ④被蛋白质起始因子识别。 ⑤与某些RNA病毒的正链RNA的合成有关。 帽子结构的生成过程： 2、加尾(poly A tail) 功能： ①提高mRNA在细胞质中的稳定性。 ②协助mRNA从细胞核向细胞质转运。 ③作为核糖体的识别信号，使mRNA分子有效翻译。 ④对基因的表达调控有重要作用。 3、mRNA前体（hnRNA）的拼接 snRNP与hnRNA结合成为剪接体 在细胞核中hnRNA的拼接： 首先在核酸内切酶作用下剪切掉内含子，然后在连接酶作用下，将外显子各部分连接起来，而变成熟的mRNA。 hnRNA和成熟mRNA杂交图 剪接过程的二次转酯反应 真核生物rRNA前体比原核生物大，哺乳动物的初级转录产物为45S，低等真核生物的rRNA前体为38S，真核生物5S RNA前体独立于其他三种rRNA的基因转录。 二、rRNA转录后的加工 三、tRNA转录后的加工 tRNA前体 RNA pol Ⅲ TGGCNNAGTGC GGTTCGANNCC DNA RNaseP 内切酶 目 录 tRNA核苷酸 转移酶、连接酶 ATP ADP 目 录 碱基修饰 （2）还原反应 如：U ? DHU （3）核苷内的转位反应 如：U ? ψ （4）脱氨反应 如：A ? I 如：A ? Am （1）甲基化 （1） （1） （3） （2） （4） 四、 RNA编辑 第2153位密码 子CAA→UAA 载脂蛋白B mRNA的编辑 参与细胞内脂类的运输 参与以乳糜微粒形式携带食物中的脂类 本章的重点内容 1.掌握转录的概念、转录与复制的不同点、转 录的模板、编码链、不对称转录的基本概念； 2.掌握大肠杆菌RNA聚合酶的组成及功能； 3.掌握真核生物mRNA转录后加工中5’-端帽子 结构与功能、3’-端尾巴的功能。 * * * 原核生物的RNA聚合酶在合成RNA时需要下列成分： （1）模板 首选模板是双链DNA。单链DNA亦可作为模板。 单链或双链RNA以及RNA-DNA杂交链都不是有效的模板。 （2）活化前体 需要所有四种核苷三磷酸：ATP，GTP，UTP及CTP。 二价金属离子：Mg2+或Mn2+都有效。在体内则要求Mg2+。 所有原核生物的RNA聚合酶在结构、组成、功能上都与大肠杆菌E.coli的RNA聚合酶相似，并且都受利福平或利福霉素的特异性抑制。 （专一性地结合β亚基） * 目 录 目 录 目 录 目 录 目 录 上一章的重点内