附录:常用试剂配制及应用
一、常用缓冲液、试剂的配制
碳酸盐缓冲液0.2 mol/L碳酸盐缓冲液(pH9.2~10.7)
0.2mol/L Na2CO3
(ml) 0.2mol/L NaHCO3 (ml) pH 0.2mol/L Na2CO3
(ml) 0.2mol/L NaHCO3 (ml) 9.2 4.0 46.0 10.0 27.5 22.5 9.3 7.5 42.5 10.1 30.0 20.0 9.4 9.5 40.5 10.2 33.0 17.0 9.5 13.0 37.0 10.3 35.5 14.5 9.6 16.0 34.0 10.4 38.5 11.5 9.7 19.5 30.5 10.5 40.5 9.5 9.8 22.0 28.0 10.6 42.5 7.5 9.9 25.0 25.0 10.7 45.0 5.0 磷酸缓冲液磷酸盐使用最广泛的一种缓冲剂,由于它们是二级解离,有二个pKa 值,所以用它们配制的缓冲液,pH 范围最宽NaH2PO4:pKa1=2.12,pKa2=7.21; Na2HPO4:pKa1=7.21,pKa2=12.32
另外,磷酸盐钾盐低温时钠盐难溶,钾盐易溶,但若配制十二烷基硫酸钠SDS)-聚丙烯酰胺凝胶电泳的缓冲液时,只能用钠而不能用钾,因为SDS会与钾生成难溶的十二烷基硫酸钾。磷酸缓冲液的优点为:①配制成的缓
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