(1)人工合成目的基因的途径有哪两条? ①将从细胞中提取分离出来的基因作为模板,转录成mRNA,再经逆转录成单链DNA,按互补原则合成双链DNA;②根据蛋白质中氨基酸序列推测出mRNA中碱基序列,然后再推出DNA的碱基序列,最后通过化学方法合成目的基因。 (2)如何将目的基因和质粒结合成重组质粒(重组DNA分子)? ①用一定的限制酶切割质粒,使其出现一个有黏性末端的切口;②用同种限制酶切割目的基因,产生相同的黏性末端;③将切割下来的目的基因片段插入到质粒的切口处,再加入适当的DNA连接酶,使质粒与目的基因结合成重组质粒。 (3)目前把重组质粒导入细菌细胞时,效率还不高,导入完成后得到的细菌,实际上有的根本没有导入质粒,有的导入的是普通质粒A,只有少数导入的是重组质粒。以下步骤可鉴别得到的细菌是否导入了质粒A或重组质粒:将得到的细菌涂布在一个含有氨苄青霉素的培养基上,能够生长的就导入了质粒A或重组质粒;反之就没有。用这种方法鉴别的原因是_________________________ __________________________。 普通质粒A和重组质粒都 含有抗氨苄青霉素基因 (4)若把通过鉴定证明导入了普通质粒A或重组质粒的细菌放在含有四环素的培养基上培养,会发生的现象是___________________
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