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第 6 章 RNA的生物合成 （转录） RNA Biosynthesis, Transcription 转录 转录 (transcription) 生物体以DNA为模板合成RNA的过程 。 也就是把DNA的碱基序列抄录成RNA的碱基序列。 参与转录的物质 原料: NTP (ATP, UTP, GTP, CTP) 模板: DNA 酶: RNA聚合酶(RNA polymerase, RNA-pol) 其他蛋白质因子 模板和酶 Templates and Enzymes 第一节 一、转录模板 结构基因：strucural gene 能转录出mRNA然后指导蛋白质生成 的部分。 模板链：template strand 可作为模板转录成RNA的一股链。也称作负链、反义链或Watson链。 编码链：coding strand 相对于模板链的另一股链。也称为正链、有义链或Crick链。 模板: 转录、翻译的序列比较 转录的不对称性 不对称转录：asymmetric transcription DNA双链对一个基因而言，一股可转录，另一股不转录。 模板链与编码链相对而言 5? 3? 3? 5? 模板链 编码链 编码链 模板链 结构基因 二、 RNA聚合酶 转录酶：依赖DNA的RNA聚合酶 DNA dependent RNA polymerase DDRP 原核生物的RNA聚合酶 大肠杆菌的RNA聚合酶：?2??’?（4种亚基组成的五聚体聚合物） 其中?2??’称为核心酶：只有转录功能 ?亚基：辨别转录起始点 ? +?2??’=全酶 受利福平或利福霉素（结核菌药物）的特异性抑制。 核心酶 (core enzyme) 全酶 (holoenzyme) 原核生物的RNA聚合酶 ? RNA聚合酶全酶在转录起始区的结合 真核生物的RNA聚合酶 RNA聚合酶II可认为是真核生物中最重要的RNA聚合酶 三、模板与酶的辨认结合 原核生物一个转录区段可视为一个转录单位，称为操纵子(operon)，包括若干个结构基因及其上游(upstream)的调控序列。 RNA聚合酶结合模板DNA的部位，称为启动子(promoter)。 目 录 开始转录 T T G A C A A A C T G T -35 区 (Pribnow box) T A T A A T Pu A T A T T A Py -10 区 原核生物启动子保守序列 RNA-pol辨认位点 (recognition site) 三、模板与酶的辨认结合 启动区的保守序列，原核生物有两个元件 -35bp的辨认位点：5’-TTGACA- 提供了RNA聚合酶σ亚基识别位点 -10bp的Pribnow盒: 5’-TATAAT β亚基结合位点，有利于DNA局部双链解开 结构基因 -GCGC---CAAT---TATA 真核生物启动子保守序列 转录过程 The Process of Transcription 第二节 （一）转录起始 转录起始需解决两个问题： RNA聚合酶必须准确地结合在转录模板的起始区域。 DNA双链解开，使其中的一条链作为转录的模板。 一、原核生物的转录过程 转录起始过程 转录空泡(transcription bubble)： RNA-pol （核心酶） ···· DNA ···· RNA （二）转录延长 1. ?亚基脱落，RNA–pol聚合酶核心酶变构，与模板结合松弛，沿着DNA模板前移； 2. 在核心酶作用下，NTP不断聚合，RNA链不断延长。 (NMP) n + NTP ?? (NMP) n+1 + PPi 转录的延长 转录的延长是以5’到3’的方向进行的。 (NMP)n+NTP?(NMP)n+1+PPi 以G=C、A=U、T=A碱基配对。 转录完成部分的DNA重新形成双链。 较长的RNA链上有核糖体结合，说明在某些情况下，转录的同时，翻译已经开始进行了。 转录的延长 5? 3? DNA 原核生物转录过程中的羽毛状现象 核糖体 RNA RNA聚合酶 （三）转录的终止 转录终止：是RNA聚合酶在模板上的某一位置停顿，RNA链从转录复合物上脱离出来。 转录终止分为： 依赖Rho（ρ）因子的转录终止 不依赖Rho（ρ）因子的转录终止 A T P 1. 依赖 Rho因子的转录终止 2. 非依赖 Rho因子的转录终止 DNA模板上靠近终止处，有些特殊的碱基序列，转录出RNA后，RNA产物形成特殊的结构来终止转录。 茎环结构使转录终止的机理