4.1噬菌体要点.pptVIP

医学微生物学Medical Microbiology 病原学教研室：王 玉 Tel: 622 2493; E-mail: wangyutony@163.com 噬 菌 体 主要内容 噬菌体的生物学性状 毒性噬菌体 温和噬菌体 噬菌体的应用 定 义 噬菌体是感染细菌、真菌、放线菌或螺旋体等微生物的病毒。 首先在葡萄球菌和志贺菌中发现。 一、噬菌体的生物学性状 类似病毒的特征 个体微小，可以通过滤菌器； 结构简单，没有完整的细胞结构，主要由蛋白质构成的衣壳和包含于其中的核酸组成； 只能在活的微生物细胞内复制增值，是一种专性细胞内寄生的微生物， 噬菌体分布极广，凡是有细菌的场所，就可能有相应的噬菌体的存在。 2、噬菌体的形态与结构 形态 个体小，在光镜下看不见，需用电子显微镜观察（nm） 蝌蚪形、微球形和细杆形 结 构 大多数噬菌体呈蝌蚪形，由头部和尾部两部分组成。 头部: 二十面体、立体对称 尾: 尾部螺旋对称，中间是尾髓（？），外部分为尾鞘、尾板、尾丝 长尾的尾髓可收缩, 短尾的尾髓不收缩 结 构 微球形 —— 无尾 细杆形 —— 无头 3、化 学 组 成 蛋白质：构成噬菌体的外衣壳（头、尾），决定外形、保护核酸，还有 ？？ 核酸：噬菌体的芯髓，遗传物质 单一类型 DNA，多为线状双链，少数为环状单链；RNA，多线状单链，双链则为线性分节段 有尾的均为线性双链DNA， 无尾的可为单链环状DNA，或线性单链RNA 4、抗 原 性 噬菌体具有抗原性，能刺激动机体产生抗体 该抗体能抑制相应噬菌体侵袭活的敏感细菌，但对已吸附或已进入宿主菌的噬菌体不起作用，噬菌体仍能复制增殖。 5、抵 抗 力——比一般细菌的繁殖体强 抵抗理化因素及多数化学消毒剂（乙醚、氯仿和乙醇）的能力比一般细菌的繁殖体强，75℃ 30min或更久才能被灭活； 耐受低温和冷冻； 但对紫外和X射线敏感，一般经紫外照射 10~15 min即失去活性。 二、噬菌体的分类 根据噬菌体与宿主菌的相互关系，噬菌体可分为两类 毒性噬菌体(virulent phage)：能在宿主细胞内复制增殖，产生许多子代噬菌体，最终裂解细菌。 温和噬菌体(temperate phage)：噬菌体基因与宿主染色体整合，不产生子代噬菌体，但噬菌体DNA能随细菌DNA复制，并随细菌的分裂而分配到子代细胞中完成传代。 1、毒性噬菌体 其能在宿主菌细胞内复制增殖，产生许多子代噬菌体，并最终裂解细菌。 增殖过程：吸附、穿入、生物合成、（组装）成熟与释放 吸 附 是噬菌体与细菌表面受体特异性结合的过程，特异性取决于噬菌体蛋白与宿主菌表面受体分子空间结构的互补吻合性。 吸 附 方 式 细杆形噬菌体以其末端吸附，有尾噬菌体以尾丝、尾刺吸附。 另有些细杆形噬菌体如M13，f1等及某些微球形噬菌体如MS2等是吸附在性菌毛上，所以只感染有性菌毛的F+菌。 只要细菌有特异性受体，不论死活噬菌体都能吸附，只是 …… 穿 入 有尾噬菌体吸附宿主后，借助尾部末端含有的一种类似溶菌酶的物质，在细菌细胞壁上溶一小孔，然后通过尾鞘的收缩，将头部DNA注入细菌体内，而蛋白衣壳留在菌细胞外。 无尾噬菌体与细杆形噬菌体可以脱壳的方式进入细菌细胞内。 生 物 合 成 转录形成mRNA，而后翻译成噬菌体所需的酶、调节蛋白和结构蛋白。 以噬菌体核酸为模板，通过宿主核酸多聚酶催化作用，大量复制子代噬菌体的基因组核酸。 成 熟 与 释 放 蛋白质和核酸合成后，在细胞质内按一定程序装配成成熟的噬菌体，构成容积内压力。 当子代达一定数目后，宿主菌细胞突然裂解，释放出的子代噬菌体又去感染新的敏感细菌。 但有些细杆形噬菌体以出芽方式逐个释放，同时宿主细胞不裂解。 毒性噬菌体的复制周期 由于在毒性噬菌体的复制周期结束时，即其子代最终成熟后的释放大多是经宿主菌体的裂解而完成，故将其复制周期称为溶菌性周期。 毒性噬菌体溶菌性周期的表现 在液体培养基中生长的细菌，感染毒性噬菌体后的溶菌现象可使浑浊菌液变为澄清。 在固体培养基中，若用适量噬菌体和宿主菌液混合后接种培养，培养基表面可有透亮的溶菌空斑出现，这称为噬斑（plaque）。 一般来说，一个空斑系由一个噬菌体复制增殖并裂解细菌后形成的。不同噬菌体噬斑的形态与大小不尽相同。 若将噬菌体悬液按一定倍数递倍稀释，通过噬斑计数，可测知一定体积内的噬斑形成单位（PFU）数目，即感染性噬菌体的浓度。 2、温和噬菌体 温和噬菌体的基因组能与宿主菌基因组整合，随宿主菌基因组的复制而同步复制，并随其分裂而平均分配至子代细菌的基因组中，该过程中，其不增殖、不引起细菌裂解。 前噬菌体(prophage)：整合在细菌基因组中的噬菌体基因组； 溶原性