人参皂甙Rg1促进嗅鞘细胞迁移及修复脊髓损伤实验研究.pdf

人参皂甙Rg1 提高嗅鞘细胞生物学活性及其机制研究 中文摘要 人参皂甙Rg1 促进嗅鞘细胞迁移及修复脊髓损伤的实验研 究 中文摘要 第一部分：人参皂甙Rg1 对嗅鞘细胞迁移能力的影响 目的：探讨人参皂甙Rg1 对嗅鞘细胞（OECs ）迁移能力及迁移相关因子基质金 属蛋白酶-2 （MMP-2 ）、基质金属蛋白酶-9 （MMP-9 ）及神经细胞黏附分子1（NCAM1 ） 表达的影响。 方法：从新生3~5d 的SD 大鼠嗅球取材获得嗅鞘细胞体外培养、纯化后，进行 人参皂甙Rg1 干预（40 μg/ml 浓度下干预72 h）并设置对照（加等量DMEM/F12 培 养基），通过划痕实验和Transwell 小室实验检测人参皂甙Rg1 对嗅鞘细胞迁移能力 的影响。反转录-聚合酶链反应（RT-PCR ）分别测定两组细胞迁移相关因子MMP-2 、 MMP-9 和NCAM1 的mRNA 表达。通过Western-blot 研究Rg1 对嗅鞘细胞PI3K/Akt 通路的影响。 结果：Rg1 组划痕愈合面积明显高于对照组 P 0.05 ；Rg1 组嗅鞘细胞穿过隔离 膜的细胞数量较对照组明显增多 P 0.05 ；RT-PCR 结果表明：人参皂甙Rg1 显著上 调嗅鞘细胞MMP-2 、MMP-9 和NCAM1 的mRNA 表达 P 0.05 。Rg1 能够促进嗅鞘 细胞PI3K/Akt 通路的活化。 结论：人参皂甙Rg1 通过上调嗅鞘细胞迁移相关因子MMP-2 、MMP-9 和NCAM1 的表达，提高细胞的迁移能力，这一作用可能通过PI3K/Akt 通路完成。 关键词：嗅鞘细胞；人参皂甙Rg1 ；迁移；基质金属蛋白酶；神经细胞黏附分子 I 中文摘要 人参皂甙Rg1 提高嗅鞘细胞生物学活性及其机制研究 第二部分：人参皂甙Rg1 促进嗅鞘细胞修复脊髓损伤的实验研究 目的：研究人参皂甙Rg1 对嗅鞘细胞（olfactory ensheathing cells, OECs ）移植修 复脊髓损伤能力的影响。 方法：新生SD 大鼠嗅球组织体外培养、纯化嗅鞘细胞，人参皂甙Rg1 干预并设 置对照，Allen 打击建立大鼠脊髓损伤模型，随机分成三组，对照组（control）、嗅 鞘细胞移植组（OECs 组）和Rg1 干预嗅鞘细胞移植组（Rg1+OECs 组），于移植后 第1、3、7、14、28 天分别进行肢体活动BBB 评分，并于第28d 取损伤部位脊髓组 织制作石蜡切片进行免疫组化检测；RT-PCR 分别测定OECs 组和Rg1+OECs 组脊髓 组织中CNTF 和VEGF 的mRNA 表达。 结果：Rg1+OECs 组后肢运动恢复情况优于 OECs 组和对照组，组织切片示 Rg1+OECs 组神经元数量明显高于OECs 组和对照组（P 0.01 ），GFAP 表达量显著 低于OECs 组和对照组（P 0.01 ），HE 染色示Rg1+OECs 组脊髓组织结构清晰，囊 性病变及细胞水肿坏死数量明显少于其它各组；RT-PCR 结果显示人参皂甙Rg1 显著 上调嗅鞘细胞在移植宿主体内CNTF 、VEGF 的mRNA 表达（P 0.05 ）。 结论：人参皂甙Rg1 能够通过上调嗅鞘细胞在宿主体内CNTF、VEGF 的表达， 提高嗅鞘细胞移植修复脊髓损伤的能力。 关键词：人参皂甙Rg1 ；嗅鞘细胞；脊髓损伤；细胞移植；基因表达 作 者：郭维潇 指导老师：陆政峰 II 人参皂甙Rg1 提高嗅鞘细胞生物学活性及其机制研究 英文摘要 Ginsenoside Rg1 promote the migration of olfactory ensheathing cells and their therapeutic effects of spinal cord injury : an experimental study Abstract Part1: Effect of ginsenoside Rg1 on migration of olfactory ensheathing cell Objective : To study the effects of ginsenoside Rg1 on migration of ensheathing olfactory cells OECs as well as their expression of migration-related factors of matrix metalloproteinase-2 MMP-2 , matrix metalloproteinase-9 MMP