生物安全柜的使用与维护.docVIP

南方医科大学珠江医院 BSC-1000ⅡB2 生物安全柜 : 邮箱:gz_sujing@126.com 联系人：刘 伟 传 生物安全柜原理生物安全柜（Biological?safety?cabinets，BSCs）是为操作原代培养物、菌毒株以及诊断性标本等具有感染性的实验材料时，用来保护操作者本人、实验室环境以及实验材料，使其避免暴露于上述操作过程中可能产生的感染性气溶胶和溅出物而设计的。当操作液体或半流体，例如摇动、倾注、搅拌，或将液体滴加到固体表面上或另一种液体中时，均有可能产生气溶胶。在对琼脂板划线接种、用吸管接种细胞培养瓶、采用多道加样器将感染性试剂的混悬液转移到微量培养板中、对感染性物质进行匀浆及涡旋振荡、对感染性液体进行离心以及进行动物操作时，这些实验室操作都可能产生感染性气溶胶。由于肉眼无法看到直径小于5μm的气溶胶以及直径为5～100μm的微小液滴，因此实验室工作人员通常意识不到有这样大小的颗粒在生成，并可能吸入或交叉污染工作台面的其他材料。已经表明，正确使用生物安全柜可以有效减少由于气溶胶暴露所造成的实验室感染以及培养物交叉污染。生物安全柜同时也能保护环境。 多年以来，生物安全柜的基本设计已经历了多次改进。主要的变化是在排风系统增加了HEPA过滤器。对于直径0．3μm的颗粒，HEPA过滤器可以截留99．97%，而对于更大或更小的颗粒则可以截留99．99%。HEPA过滤器的这种特性使得它能够有效地截留所有已知传染因子，并确保从安全柜中排出的是完全不含微生物的空气。生物安全柜设计中的第二个改进是将经HEPA过滤的空气输送到工作台面上，从而保护工作台面上的物品不受污染。这一特点通常被称为实验对象保护（product?protection）。这些基本设计上的变化使得生物安全柜都得到了改进。生物安全柜的向所有可能使用生物安全柜的用户解释安全柜的使用及限制条件。应发给工作人员操作手册。特别是必须明确告诉工作人员，在出现溅洒、破碎、方法不当的情况下，安全柜无法保护操作人员。安全柜只有在工作正常时才能使用。安全柜前脸的玻璃观察窗不得在安全柜处使用状态时打开。柜内放置的仪器和材料必须保持在最低数量。静压箱后部的空气循环不得受阻。将材料放入安全柜的工作区之前，应对其表面进行去污处理。柜内不得使用本生灯（一种煤气灯），因其产生的热会干扰气流并可能损坏过滤器。可以使用微型电焚烧炉，但使用一次性灭菌环则更好。柜内所有的工作要在工作面的中部或后部进行，并能从观察面板中看到。操作手后方的活动要达到最少。操作手不应将手臂来回伸进出柜子，以免干扰气流。前送风格栅不得被便签、滴管、或其他材料堵住，否则会干扰气流从而可能使材料受到污染，使人员处在暴露状态。应在每次工作完成后及一天结束时，使用合适的消毒剂清洁安全柜的表面柜子的风扇在工作开始前和工作完成后要再各运行5分钟。生物安全柜的清洁与消毒生物安全柜内的所有物品，包括设备，都应在工作完成之后进行表面去污处理并从柜内取出，因为残留的培养介质可能会提供微生物的生长条件。安全柜的内表面应在每次使用前与使用后进行去污处理。要用消毒剂擦拭工作台表面及内壁面，使用的消毒剂应能杀死柜内可能存在的所有微生物。一天工作结束时，应进行最后表面去污处理，即对工作台、各个侧面、背面及玻璃的里面进行全面擦拭。可以使用漂白粉液或70%酒精，这种对目标生物有效的消毒剂。如使用漂白粉液这种有腐蚀性的消毒剂，则要用灭菌水进行二次擦拭。建议工作柜在清洁、消毒时处在工作状态。如果其未处在工作状态，则应运行5分钟，以便在安全柜关闭前将其中的气体清除掉。生物安全柜的去污处理对级生物安全柜的去污，是将适量的低聚甲醛（使柜内空气中的低聚甲醛的最终浓度为80%）置于电热盘或煎锅上（从柜外控制）。另将一个放有比低聚甲醛多10%的碳酸氢的电热盘或煎锅也放在柜内（在柜外控制）。这第二个容器上应带盖，这个盖子可以从远处取下来（例如系在一根线上，线可以从柜外拉动）。这样可以使提前中和的低聚甲醛达到最小。如果相对温度低于70%，有热水的开口容器。如果没有前隔板，则要用生型塑料挡板，将其用胶带粘在前脸，确保不会有气体漏入房间。当盘内的低聚甲醛已全部挥发或开关已打开1小时后，将开关关闭。将安全柜放置一整晚不得触动。然后将第二个盘子的盖移开并打开其开关，碳酸氢氨开始挥发。这时，关闭盘子的开关，让安全柜开始工作，使碳酸氢氨气循环1小时。然后可以取下前隔板（或塑料挡板），安全柜即可使用。操作者 生物安全柜如果使用不当，其防护作用就可能大大受到影响。操作者在移动双臂进出安全柜时，需要小心维持前面开口处气流的完整性，双臂应该垂直地缓慢进出前面的开口。手和双臂伸入到生物安全柜中等待大约一分钟，以使安全柜调整完毕并且让里