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非结核分枝杆菌的研究及其进展 上海市肺科医院 非结核分枝杆菌(nontuberculous mycobacteria ,NTM)是除结核、牛型分枝杆菌和麻风分枝杆菌以外引起人们致病的分枝杆菌,其主要是引起肺部的病变,尚可引起全身其他部位的病变,常见的有淋巴结炎,皮肤软组织感染,骨髓系统感染,严重的细胞免疫抑制者可引起血源性播散。 非结核分枝杆菌虽早在1882年Koch氏发现结核分枝杆菌后不久即被注意,随后就不断有发现NTM的报道。19世纪末,已有人从临床标本中分离到NTM,但其病原学意义直到20世纪50年代初才被确认。 特别是近年来,非结核分枝杆菌引起的感染增多,原本是“条件”,“机会”致病菌的非结核分枝杆菌越来越引起人们重视,因此有必要就此问题与同道们共同探讨。 一、非结核分枝杆菌的命名: 从发现NTM以来,命名繁杂,在不同年代曾使用过不同名称,直到80年代末至90年代初,命名比较趋向一致,普遍称为非典型分枝杆菌或非结核分枝杆菌。其实非典型分枝杆菌的命名是不合理的,因为每一种分枝杆菌都有其固有的生物学特性,因此在国际上多称为非结核分枝杆菌,我国是在1993年黄山会议上正式命名为非结核分枝杆菌。 二、对非结核分枝杆菌的认识过程: 人们对非结核分枝杆菌的研究和认识是随着时间的推移而逐渐深入的。大致可分为三个阶段:1950以前为第一阶段,此阶段只有散在的病例报告;1950~1970年为第二阶段,此阶段研究了组织学与诊断标准,特别是在1954年Timple和Runyon(鲁尼恩)第一次系统地提出了分枝杆菌的分类,开创NTM研究的起点; 1970年以后为第三阶段,此阶段深入研究了细菌学及鉴定方法。1979年在美国丹佛国际会议上第一次阐述了NTM的流行病学、发病原因、分类学、分子遗传学,使非结核分枝杆菌的研究更加深入。另外,由于国际上AIDS的流行使NTM的发病率迅速增高,也进一步促进对NTM的研究。 三、非结核分枝杆菌的分类: 目前对NTM分类的方法有多种,兹将常用的和最新的几种作一介绍: 1、?伯杰细菌鉴定手册分类法(1986年,第八版): (1)、快生长型:7天内在固体培养基上可见菌落。(见表2) (2)、慢生长型:7天以上在固体培养基上方见菌落。(见表3) ????????? Runyon(鲁尼恩)分类法: 在1959~1965年间,Runyon收集了30多个国家的400多种进行研究,根据分枝杆菌的形态学,培养,暴光后产色性,生长快、慢的特征,将NTM分为四群:Ⅰ群光产色菌(Photchromogens)、 Ⅱ群暗产色菌(Scotochromogens)、Ⅲ群不产色菌(Nonphotchromogens)均为慢生长菌;Ⅳ群为快生长菌(Rapid growers)。(见表4) ? 数值分类技术—语义学分类(numerial taxonomic techniques—semantide based analysis): 1967年成立的国际分枝杆菌分类学工作组(IWGMT)根据培养和生化反应的结果,对在不同程度上有相似水平的分枝杆菌进行分组,构成树状谱,分析慢生长型分枝杆菌表型,用数值分类技术确定各自相关的分枝杆菌组。 此法将每一菌株的每一性质和特点算作一个相等重量,按菌株的共同特点的含量分组,其与种系发生数值相一致。对每一菌种表型特征的分析提供了区分其他菌种的数据,同一种分枝杆菌相似性85%。近年来国际分枝杆菌分类学工作组在数值分类的基础上,对分枝杆菌开始了新的分类研究—语义学分析。即:细胞大分子如蛋白质、RNA、DNA 的分析,包括核苷酸测序,亲和结合技术评价语义相关水平。 用树状谱表示菌种关系一目了然,目前构建树状谱使用核糖体RNA(16sRNA),显示所有分枝杆菌间相互密切关联,而和其他菌属则有距离。分枝杆菌快生长型与慢生长型的表型有主要区别点,即快生长型菌种间的关系比任何慢生长型菌种间的关系更接近。研究结果表明,在表型、化学分类组和语义学分析鉴定的分枝杆菌间有很好的一致性。 四、非结核分枝杆菌流行病学趋势: NTM的流行情况,因地区、人种不同对其重视程度、检查、鉴定方法不同而异,据统计,1992年前全球经鉴定确认由非结核分枝杆菌引起的NTM病有1522例,中国达85例,太平洋西南岸发病率最高。日本感染1971年为0.89/10万,1978年为1.92/10万,1993年为16.2/10万,美国为2.0/10万,特别是在HIV/AIDS流行后,NTM病感染率迅速上升,美国及欧洲25%—50%AIDS患者并发NTM感染,主要由鸟分枝杆菌(MAC)引起,大大超过患AIDS前发病率高的堪萨斯及胞内分枝杆菌。 我国在1979年全国第一次结核病流调中,对六省二市(
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