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三、微生物生长的测定 微生物生长 说明: 血球计数板是一块特制的载玻片,上面有一计数室,面积是1mm2,高0.1mm,容积是0.1mm3(0.1μL),整个计数室被划分为25中格即400(25×16)个小格,当稀释的菌悬液被加到计数室后,通过计算方格中的菌数可推算出计数室内的总菌数,从而求出每毫升菌液所含的菌数。 推导公式: 1mL菌液中的总数= 80个小格内酵母菌细胞数 80 5个方格中菌总数 5 适用范围:个体较大细胞或颗粒,如血球、酵母菌等。不适用于细菌等个体较小的细胞,因为 (1)细菌细胞太小,不易沉降; (2)在油镜下看不清网格线,超出油镜工作距离。 特点:快速,准确,对酵母菌可同时测定出芽率,或在菌悬液中加入少量美蓝可以区分死活细胞。 电子自动计数器法 微生物的生长规律 单细胞微生物纯培养群体生长测定 分批培养 batch culture 将微生物置于一定容积的培养基中,在特定的培养条件下,只完成一个生长循环(最后一次收获的培养方法。 如:摇瓶培养 特点:培养基一次加入,不补充不更换。 营养物浓度与对数期生长速率和产量 作用方式:影响微生物的生长速率和总生长量 生长限制因子:凡是处于较低浓度范围内,可影响生长速率和菌体产量的营养物就称生长限制因子 培养温度对微生物速率的影响 五、连续培养 continuous culture 连续培养 在培养器中不断补充新鲜营养物质,并及时不断地以同样速度排出培养物,使微生物的增殖速度及培养基中的总菌量保持不变的培养方法。(长期保持在指数期的平衡生长状态和恒定的生长速率) 连续培养用于生产实践就称连续发酵. 一个重要特征: 是使微生物的增殖速度和代谢活性处于某种稳定状态。 恒化器法 恒浊器法 影响微生物生长的外界因素很多,除了营养因素之外,还有许多物理化学条件。 一、温度对微生物生长的影响 二、氧气对微生物生长的影响 三、pH值对微生物生长的影响 微生物生命活动能改变外界环境pH,如 糖类----- pH↓ 有机物 脂肪----- pH↓ 培养基内 蛋白质---- pH↑ 中性成分 (NH4)2SO4----pH↓ 无机盐 NaNO3 ----- pH↑ 过酸时:加NaOH、Na2CO3等碱液中和 治标 过碱时:加H2SO4、HCl等酸液中和 pH 调节 加适当氮源:加尿素、 NaNO3、 过酸时 NH4OH 或蛋白质等 治本 提高通气量 加适当碳源:加糖、乳酸、醋酸、 柠檬酸或油脂 过碱时 降低通气量 情境一:在某餐厅的厨房内悬挂紫外灯; 情境二:SARS期间学校喷洒过氧乙酸 ; 情境三:把食物贮存在冷冻室; 情境四:吃抗生素治疗肠炎。 灭菌(sterilization) 消毒(disinfection) 是一种采用较温和的理化因素,仅杀死物体表面或内部一部分病原菌的措施称为消毒。 防腐(antisepsis) 防腐就是利用理化因素完全抑制微生物的生长的措施。 化疗(chemotheraphy) 指利用具有选择毒性的化学物质抑制寄主体内病原微生物或病变细胞的治疗措施称为化疗。 二、常用的化学控菌方法 在评价消毒剂、防霉剂、化学治疗剂等的药效和毒性时,经常采用以下3种指标: (1)最低抑制浓度(MIC),是评定某化学药物药效强弱的指标,在一定条件下,某化学药剂抑
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