S20135417-肖春林-小麦外源染色体片段鉴定方法比较要点.docVIP

小麦外源染色体片段鉴定方法比较 肖春林 作物 摘要：对5种鉴定小麦背景中1BL/1RS易位染色体的生化和分子标记方法，包括酸性聚丙烯酰胺凝胶电泳(A)、荧光原位杂交(FISH)、RAPD、特异性PCR标记、和RELP，进行比较研究。结果表明，5种方法中除了RAPD标记难以鉴定1BL/1RS易位染色体，其他方法都能对1BL/1RS易位染色体进行有效的鉴定。RFLP和FISH方法比较费时费力且花费昂贵，特异性PCR标记又在一定程度上受模板DNA浓度的影响。因此认为，酸性聚丙烯酰胺凝胶电泳(A)方法是一种简单、快速、经济有效的方法，最易于在小麦育种选择中应用。 关键词：小麦；1BL/1RS易位染色体；特异性PCR标记；A；FISH； RFLP；RAPD Abstract：For five kinds of appraisal 1BL/1RS translocation chromosomes in wheat background of biochemical and molecular marker method, including acid polyacrylamide gel electrophoresis (A), fluorescence in situ hybridization (FISH), RAPD, specific PCR markers, and RELP, A comparative study.The results showed that RAPD markers are difficult to identify 5 ways, in addition to 1BL/1RS translocation chromosomes, other methods can effectively of the 1BL/1RS translocation chromosomes of identification.RFLP and FISH method is time-consuming and expensive, specific PCR markers and to a certain extent, affected by the concentration of template DNA.Therefore believe that acid polyacrylamide gel electrophoresis (A) method is A simple, rapid, economic and effective method, the most easy to application in wheat breeding selection. Key words: Wheat;1BL/1RS translocation chromosomes ;Specific PCR markers;A - PAGE;The FISH; RFLP;RAPD 在全世界范围内，1BL/1RS小麦一黑麦易位系作为优异基因资源在小麦改良中广泛利用。这主要是由于1BL/1RS易位染色体的1RS片段上不但具有抗条锈病(Yr9)、叶锈病 (Lr26)、秆锈病(St31)和白粉病(Pm8)等抗病基因,还携带有提高小麦产量和增强小麦对环境适应性的基因。在四川省1998-1999年省区试的24个优良新品系中20个新品系含有1BL/1RS易位染色体,可见1BL/1RS易位染色体对四川的小麦改良仍具有重要的作用。许多方法可用于鉴定小麦背景中1BL/1RS易位染色体，包括形态学标记、抗性反应、生化标记，细胞学鉴定，基因组原位杂交、PCR标记等。广大小麦育种者最关心的是选用一种快速、经济、简单易行的方法来对杂种后代群体进行有效鉴定。Javornik等对几种鉴定小麦背景中1BL/1RS易位染色体的细胞学和生化标记方法进行比较研究，认为N-带技术是最费时费力的一种方法,而生化标记则是比较简单快速的方法。90年代以后,伴随着分子标记技术的发展与成熟,又出现了一些鉴定小麦背景中1BL/1RS易位染色体的分子标记方法，如荧光原位杂交(FISH)和特异性PCR标记等。本研究的目的是对酸性聚丙烯酰胺凝胶电泳(A)、荧光原位杂交(FISH)、RAPD、特异性PCR标记、和RFLP等5种鉴定小麦背景1BL/1RS易位染色体方法进行比较研究，以便为育种者选用1BL/1RS易位染色体的鉴定方法提供理论依据。 一、材料与方法 1.1 实验材料 实验材料主要包括秦岭黑麦、多小穗小麦10-A、普通穗型小麦品系88-1643、Aurora、川育12、中国春、以及来源于三交组合10-A/88-1643